一种小鼠外周血中性粒细胞分离方法的优化改良
摘 要:建立一套简便、高效的小鼠外周血中性粒细胞分离纯化方法。基于Percoll密度梯度离心法采用两步式离心程序替代传统单次密度梯度离心。在密度梯度离心全程维持 :4°C 温度控制,并对离心力和离心时间等进行优化。对两种方法分离提取的中性粒细胞进行计数,并通过Ly6G抗体染色测定细胞纯度。结果显示,使用两步式离心优化改良法提取的中性粒细胞数量可达( 7.5±0.1 ) ×107 个/mL,显著高于单次密度梯度离心法( 5.2±0.3)×107↑/mL ;纯度为( 92.52±2.07 ) 0% ,显著高于单次密度梯度离心法( 64.45±2.24 ) 0% 。该方法能够获得高纯度的中性粒细胞,是一种简单、易操作的体外分离纯化小鼠外周血中性粒细胞的方法。
张寓鑫 付秋霞 王 蕾 李东东 易晓阳 阎少多