牛病毒性腹泻的诊断及防控措施

牛病毒性腹泻（Bovine Viral Diarrhea, BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（BVDV）引起的一种全球性传染病，对养牛业造成严重的经济损失。BVDV属于黄病毒科瘟病毒属，具有高度变异性，可分为两种生物型：致细胞病变型（CP）和非致细胞病变型（NCP），以及两种基因型（BVDV-1 和BVDV-2）。该病临床表现多样，包括急性腹泻、黏膜病变、免疫抑制、繁殖障碍（如流产、死胎）及持续性感染（PI）牛的出生，其中PI 牛是病毒在牛群中持续传播的关键源头。随着养殖业集约化发展，BVD 的流行呈现复杂化趋势，诊断和防控面临巨大挑战。早期准确诊断和综合防控措施是控制该病的关键。

1 流行病学

BVDV 属于黄病毒科瘟病毒属，分为 BVDV-1 和 BVDV-2 两种基因型，其中 BVDV-2 毒力更强，可引发严重出血综合征。病毒具有致细胞病变型（CP）和非致细胞病变型（NCP） 两种生物型，NCP 型易导致持续性感染（PI），成为牛群主要传染源。BVD 呈全球性分布，在养牛业发达地区危害尤为严重。该病传染源广泛，其中PI 牛作为终身排毒者是最主要的传染源，同时急性感染牛、隐性感染牛及污染的精液和胚胎也可传播病毒。病毒可通过水平传播和垂直传播等多种途径扩散。所有年龄段的牛均易感，其中幼畜和孕牛症状更为严重，而羊、猪等动物虽可感染但通常不表现症状。BVD 的流行形式多样，既可表现为地方性流行，也可呈现暴发性流行。该病全年均可发生，无明显季节性，但在冬季舍饲期或运输应激后更易暴发。

2 临床症状

患病牛高热（ 40–42^∘C ）、精神沉郁、食欲废绝、口腔及鼻腔黏膜糜烂溃疡，特征性症状为水样至血样腹泻并伴有恶臭，部分患牛可见趾间皮肤溃疡和蹄叶炎。妊娠母牛感染后可导致繁殖障碍，表现为早期胚胎死亡、木乃伊胎、流产或产出先天性缺陷犊牛，若在妊娠40-125 天感染则可能产下PI 犊牛。新生犊牛感染后常见发育迟缓、共济失调等神经症状。BVDV-2型毒株感染可引起更为严重的出血性综合征，表现为皮肤及黏膜广泛出血、血便和高死亡率。亚临床感染在成年牛中较为常见，但会导致免疫抑制，易继发呼吸道和消化道疾病。持续性感染牛通常表现生长发育不良、被毛粗乱和反复腹泻，最终多死于黏膜病或继发感染。

3 剖检变化

解剖病死牛可见，口腔、食道及前胃黏膜可见广泛性糜烂和溃疡，溃疡灶边缘整齐、底部呈红色，严重病例可形成伪膜性病变。真胃和肠道黏膜充血出血，肠壁变薄，肠内容物呈血样或含有纤维素性渗出物。特征性病变表现为整个消化道黏膜的坏死性炎症，尤其回肠末端和结肠淋巴集结处可见明显的溃疡灶。淋巴结普遍肿大、出血，切面多汁呈大理石样变。脾脏出现梗死灶，肺部常见间质性肺炎病变。妊娠母牛子宫内可见木乃伊胎或自溶胎儿，胎盘绒毛膜充血水肿。PI 牛通常呈现胸腺萎缩和淋巴组织发育不良等免疫器官病变。

4 诊断方法

RT-PCR 检测，首先采集抗凝血、组织或鼻拭子样本，提取RNA 后逆转录合成cDNA。针对BVDV 高度保守的5'-UTR 区域设计特异性引物，进行PCR 扩增。反应体系包含 Taq 酶、dNTPs 和缓冲液，程序设置为： 94^∘C 预变性 5 分钟； 94^∘C 30 秒、 55^∘C 30 秒、 72^∘C 30 秒，循环 35 次； 72^∘C 延伸 10 分钟。扩增产物经 1.5% 琼脂糖凝胶电泳，在紫外灯下观察预期大小条带（约 300bp）。阳性样本可进一步通过实时荧光定量 PCR 或测序分析进行分型（BVDV-1/BVDV-2）。该方法灵敏度高，3-4 小时即可获得结果，但需设置阴性对照和阳性对照防止污染。

5 治疗方法

针对牛病毒性腹泻的治疗，应采取中西医结合的综合策略。首先，在急性期，通过静脉输注复方氯化钠或林格氏液，按体质量每天 30-50mL/kg ，纠正脱水和酸中毒，同时皮下注射重组牛干扰素，剂量为体质量 1 万-2 万IU/kg，每日1 次，连用3-5 天，以抑制病毒复制，控制病毒血症。发病24小时后，加用葛根芩连汤，组方为葛根 30g. 、黄芩15g、黄连10g、甘草10g、木香10g、白头翁 20g ，煎汤灌服，成牛每日1 剂，犊牛减半，连用3-5 天，以增强抗病毒效果，清热燥湿，凉血止痢。进入恢复期后，转用参苓白术散，组方为党参 20g 、茯苓 15g、白术 15g、山药 20g 、薏苡仁 30g、砂仁6g、甘草 6g ，煎汤或研末拌料，成牛每日1 剂，连用7-10 天，以促进肠道黏膜修复，健脾益气。整个治疗过程中，需密切监测体温、粪便性状及脱水程度，适时调整补液量，并可联合广谱抗生素预防继发感染，同时提供易消化饲料，补充电解质及维生素，以支持营养恢复。

6 预防措施

6.1 清除持续感染牛

PI 牛是牛病毒性腹泻病毒在牛群中持续传播的核心传染源，因此清除PI 牛是防控该病的关键措施。具体实施时，首先需通过 RT-PCR、抗原捕获ELISA 或病毒分离等方法对全群牛进行筛查，重点检测新生犊牛、流产胎儿及引进牛只；对检出的PI 牛应立即隔离并淘汰，严禁其进入健康牛群或交易市场。同时，对曾与PI 牛接触的牛只进行复检，并加强隔离观察。在清除过程中，需配合严格的生物安全措施，包括对PI 牛接触过的圈舍、器具等进行彻底消毒（推荐使用醛类或氯制剂），并避免与其他牛群共用器械或饲料。

6.2 构建免疫屏障

疫苗接种是预防BVD 的核心策略，通过构建群体免疫屏障可有效降低病毒传播风险。应选用包含BVDV-1 和BVDV-2 双价灭活疫苗或基因工程疫苗，对全群牛实施科学免疫程序：后备牛在6-8 月龄首免，间隔3-4 周加强免疫；成年母牛每年定期免疫，妊娠期避免使用弱毒苗以防垂直传播。重点加强繁殖母牛的免疫保护，配种前完成基础免疫，确保高水平的母源抗体保护犊牛。

6.3 严格的生物安全管理

建立封闭式饲养管理制度，严禁引入未经检疫的牛只，新进牛必须隔离观察 30 天并经 BVDV 检测阴性后方可混群；定期对圈舍、饲槽及器械进行彻底消毒，优先选用戊二醛、过硫酸氢钾等对瘟病毒有效的消毒剂；实行全进全出制，避免不同批次牛群交叉接触；严格管控人员、车辆及物品流动，进出场区需执行更衣消毒程序；加强粪污无害化处理，防止环境污染导致病毒扩散；规范人工授精操作，确保使用的精液经过BVDV 检测。

7 结束语

牛病毒性腹泻的防控关键在于建立"检测-清除-免疫"三位一体防控体系。通过RT-PCR 等检测技术及时筛查PI 牛并彻底清除，结合科学免疫程序构建群体免疫屏障，同时严格执行生物安全管理措施。实践表明，该综合防控方案可使牛群感染率降低 80% 以上。建议养殖场坚持定期监测、规范免疫和严格消毒，从而有效控制本病传播，保障牛群健康生产。

参考文献：

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