马关香竹组织培养初探

摘要：以马关香竹（Chimonocalamus makuanensis）的幼叶、笋芽为材料。在MS培养基附加细胞分裂素KT、BA和生长素NAA、2，4-D中进行培养，诱导愈伤组织以及笋芽，结果表明，MS+NAA1mg/L +KT2mg/L+AC0.3%诱导马关香竹愈伤组织的产生效果较好，MS+2，4-D0.5mg/L +KT1.5mg/L+AC0.3%诱导马关香竹笋芽效果较好。

关键词：马关香竹  组织培养   生长素   激素   愈伤组织

前言

马关香竹[1]（Chimonocalamus makuanensis）是禾本科、香竹属植物， 生于海拔1700-1900m的常绿阔叶林内，特产于云南马关县，笋味佳。竿高5-6m，粗1.5-2.5㎝，共约30余节；节间长10-27㎝，淡绿色，壁厚4-6㎜；节内长4-6㎜；末级小枝具3或4叶；叶鞘长3-5㎝，无毛或外缘的上部生纤毛；叶舌呈弧形突出，高约1.5㎜，背面被微毛；叶片长9-13㎝，宽9-13㎜，下表面灰绿色，次脉4对。花序未见。笋期春季至秋季。

1.实验材料

1.1实验原料：马关香竹幼叶、笋芽。

1.2实验试剂：活性炭、琼脂、激素（BA、KT）、植物生长调节剂（NAA、2，4—D）、土温（70%）、95%酒精、洗衣粉、蒸馏水。

2.实验方法

2.1贮备液的配制

2.1.1MS贮备液的配制

本次实验以MS培养基作为基本培养基[3]。

2.1.2激素贮备液的配制

培养基中所需激素包括生长素NAA（α-萘乙酸）、2，4—D（2，4—二氯苯氧乙酸）和细胞分裂素BA（6—苄基腺嘌呤）、激动素KT（6—糖氨基腺嘌呤）。附加的激素以贮备液形式配制备用[4]。

2.1.3培养基配制

根据需要量取各种贮备液，经混合后，加入3%蔗糖，定容，调整PH值（约在5.8左右）后，加入0.4%的琼脂，加入0.5%的活性炭[4]，加热熬制至溶化后分装到三角瓶，灭菌。设A、B、C、D四个大组。

2.2接种与培养

2.2.1材料的采取与预处理

材料用洗衣粉浸泡30分钟，然后用自来水冲洗40分钟，捞出后送无菌接种室备用。

2.2.2灭菌与接种

在超净工作台上，将彻底灭菌过的笋芽用剪刀除去无用部分，叶片切成1.0cm左右的长段，在酒精灯火焰上方接种至各组培养基中，封好瓶口，移入培养室培养。

2.2.3培养条件  培养室温度为15-26℃，湿度为60%-80%，光照强度为2000LUX，光照时间为12小时[3]。

3实验结果

3.1A组情况：30天后，20.2%的外植体产生颗粒状的愈伤组织，18.1%的外植体有笋芽萌动现象。

3.2B组情况：30天后，16.1%的外植体产生颗粒状的愈伤组织，17.2%的外植体有笋芽萌动现象。

3.3C组情况：30天后，16.8%的外植体产生颗粒状的愈伤组织，15.8%的外植体有笋芽萌动现象。

3.4D组情况：30天后，18.3%的外植体产生颗粒状的愈伤组织，16.1%的外植体有笋芽萌动现象，

4讨论与分析

4.1植物激素对马关香竹愈伤组织产生的影响

4.1.1激素种类的影响  当用NAA，2，4-D时，细胞分裂素用KT、BA与之搭配，观察细胞分裂素KT、BA对愈伤组织产生的影响，结果见表7：

从表7中可以看出，用生长素NAA的A、B两组，A组的平均诱导率高于B组，说明与NAA搭配时，KT的效果好于BA；用生长素2，4-D的C、D两组，C组的平均诱导率高于D组，说明与2，4-D搭配时，KT的效果好于BA。从各组的平均诱导率可以看出，A组的生长素NAA与激素KT搭配效果好于其他各组。

4.1.2 激素浓度的影响。

在生长素与细胞分裂素的浓度配比中，诱导马关香竹愈伤组织的最适生长素为NAA，浓度为1mg/L，最适细胞分裂素为KT，浓度为2mg/L；而诱导马关香竹笋芽萌动的最适生长素为2，4-D，浓度为0.5 mg/L，最适细胞分裂素为KT，浓度为1.5mg/L。

[参考文献]

1.文山壮族苗族自治州林业局编著.文山壮族苗族自治州树木图志.云南文山.2008.

2.树木学（南方本）编写委员会.树木学（南方本）[M].北京：中国林业出版社，1994.

3.杨增海.园艺植物组织培养[M].北京：农业出版社，1987.

4.王廷晋.滇润楠组织培养初探[J].思茅师范高等专科学校学报.2008，（06）：4-9