花石和胃合剂制备工艺的优化

花石和胃合剂由旋覆花、党参、生姜、赭石、半夏、白术、茯苓、大枣、枳实等16 味药材组成，具有疏肝理气，健脾和胃的功效，临床上用于治疗中虚气逆型反流性食管炎[1]，原方汤剂内服有良好的临床疗效，但提取麻烦、体积大、口感不佳、部分患者不易接受。中药合剂由汤剂改进而来，既保持了汤剂原有的优点与疗效，又有固定的工艺方法，可成批生产，应用方便，故拟将本方制成合剂[2]。文献调研发现，方中砂仁[3]、豆蔻[4]等药材发挥功效的主要成分为挥发油，而旋覆花[5]、党参[6]等药材主要为水溶性成分。本实验通过水蒸气蒸馏法提取挥发油，药渣与旋覆花、党参等药材合并进行水提取，通过正交试验，以枳实中辛弗林含量以及浸膏得率作为评价指标，优选水提工艺，并对其浓缩工艺和成型工艺进行考察，为该制剂的临床使用、成批生产提供依据和参考。

1 材料

1. 1 仪器旋转蒸发仪（上海亚荣生化）；TLE204 电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；TC-15 恒温电热套（海宁市华星仪器厂）；Agilent1200 高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司）

1. 2 试药辛弗林对照品批号为 110832-202112，购自中国食品药品检定研究院；旋覆花、党参等药材购自重庆泰尔森制药有限公司，均符合 2020 年版《中国药典》一部各药材相关项下要求。磷酸二氢钾、十二烷基磺酸钠、冰醋酸等试剂为分析纯；甲醇为色谱纯；水为双蒸水；聚山梨酯 80、甜菊素为药用级。

2 方法与结果

2. 1 挥发油提取工艺研究以挥发油提取率为指标，采用单因素试验考察加水量、提取时间对挥发油提取的影响。按处方比例，称取砂仁、豆蔻 14 份，每份，由于预试验发现所得挥发油比重小于 1.0，故按照 2020 年版《中国药典》四部 2204 项下挥发油测定法甲法提取。最终确定，挥发油提取工艺为药材加 10 倍量水蒸馏 5 h，挥发油提取率为，与单因素结果相近。

2. 2 浸膏得率测定精密移取浓缩液，置于已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于干燥至恒重，置干燥器中冷却，精密称定质量，计算浸膏得率，公式为总质量= ，其中 W 为浓缩液中浸膏质量，500 为溶液定容体积（mL）。

2. 3 含量测定

2. 3. 1 色谱条件

以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱为 250mm×4.6mm，5μm；以甲醇-磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾 0.6g，十二烷基磺酸钠 1.0g，冰醋酸 1mL，加水溶解并稀释至 1000mL）（50∶50）为流动相；流速为 1.0mL/min；检测波长为 275nm；柱温为 35℃；进样量为 20μL。理论板数按辛弗林峰计算应不低于 3000。

2. 3. 2 对照品溶液制备取辛弗林对照品，精密称定（2.05mg），加甲醇制成每 1mL含辛弗林 20μg 的溶液，即得。

2.3.3线性关系考察分别精密吸取“2.3.6项下”线性贮备溶液（200.0µg/mL）3.0，4.0，5.0，6.0，7.0mL置于50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，取上述各线性溶液，按上述色谱条件进样20µL，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，进行线性回归。辛弗林的回归方程为A=495.82C-1651，r=0.9993，表明辛弗林在12.02～28.04µg/mL的浓度范围内呈良好的线性关系。

2. 3. 4 溶液制备

对照品溶液：取辛弗林对照品适量，精密称定。加 50%甲醇制成每 1mL 含 20μg的溶液，即得。

供试品溶液：取本品适量，研细，取约 0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 50%甲醇 25mL，密塞，称定重量，加热回流 1 小时，放冷，再称定重量，用 50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

阴性样品溶液：称取除枳实以外的其他药材适量，加 10 倍量水提取 2 次，每次 2h，常压浓缩，制成不含枳实的浓缩丸，按“供试品溶液”项下方法制备，即得。

线性贮备溶液：取辛弗林对照品 10mg，置 50mL 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

2. 4 水提工艺研究根据处方比例称取旋覆花、党参、生姜、赭石、半夏、白术等药材 9 份，每份 190g，按 L9（34）正交设计表进行试验，选取加水量（A）、提取时间（B）、提取次数（C）为考察因素，每个因素设 3 个水平，以浸膏得率和辛弗林含量的综合评分值为指标，应用综合加权评分法进行分析。权重系数分别为 0.4、0.6，即综合评分=（浸膏得率/浸膏最高得率× 0.4）+（辛弗林含量/辛弗林最大含量× 0.6）×100。

因素水平见表 1，试验安排及结果见表 2，方差分析

见表 3。