S1PR1 对心肌梗死后 NT- proBNP、TNF- α 和 IL- 6 的影响

Abstract ∵ Objective： To investigate the effect of S1PR1 on NT-proBNP，TNF-a and IL-6 after myocardial infarction. Methods： A mouse model of myocardial infarction was established and divided into a treatment group and a control group.The treatment group was intraperitoneally injected with S1PR1 receptor agonist for one week.The levels of NT-proBNP，TNF-a and IL-6 in serum were measured four weeks after the operation.Results： the level of NT-proBNP，TNF-a and IL-6 in serum of the treatment group was significantly lower than the control group（P ⋅<0.05 . Conclusion： The application of S1PR1 after myocardial infarction can improve ventricular function， reduce the content of NT-proBNP，TNF-a and IL-6 in serum，and alleviate the impact on myocardium.

Key words ∵ AMI S1PR1 NT-proBNP IL-6

冠心病是危害中老年人健康的常见病，其主要是由于冠状动脉发生粥样硬化所致。随着中国人口老龄化，冠心病已成为致死的主要原因[1]。其中心肌梗死是心血管疾病致死致残的主要原因[2]，心肌梗死引发过度的炎症反应加重心脏重构，导致心力衰竭。磷酸鞘氨醇（S1P）是一种存在于细胞内外的脂质代谢产物，由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨醇生成，通过与其特异性受体结合，激活细胞内信号转导通路影响细胞的增殖、迁移、黏附、炎症等，在心血管、神经、免疫、呼吸等多个系统有着重要的作用[3]。目前研究发现S1P 受体包括5 种亚型S1PR1-5，研究证实S1PR1 能促进心肌梗死后血管新生，从而改善心室重构[4]。本研究以小鼠为研究对象，通过结扎左冠状动脉前降支建立小鼠心肌梗死模型，研究S1PR1 对心肌梗后NT-proBNP、IL-6和 TNF-a 的影响。

1 材料和方法

1.1 实验动物

SPF 级 C57BL/6 小鼠，全部为雌性小鼠，年龄在 8-10 周龄，体重控制在 20-25g ，每组15 只。

1.2 心肌梗死模型制备和处理

实验小鼠随机分为实验组和对照组。参照文献报道的方法[5]，采用左冠状动脉前降支结扎术，建立急性心梗模型（结扎处远端心肌组织变为白色为模型制备成功）。实验组腹腔注射S1PR1 激动剂1 周，对照组注射生理盐水。

1.3 ELISA 检测 NT-proBNP、IL-6 和 TNF-a

4 周后采小鼠外周静脉血，以EDTA 抗凝，在 4℃下以 1500rpm ，离心 10min ，吸取上清，分装在新试管中（血浆试管），保存在- .80^∘C 低温冰箱备用。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中NT-proBNP、IL-6 和TNF-a 的表达，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 统计学方法

应用 SPSS18.0 软件进行统计处理与分析，计数资料比较采用χ 2 检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清 NT-proBNP 水平比较

实验组的血清 NT-proBNP 水平为 103.5± 51.7pg/ml ，对照组的血清 NT-proBNP 水平为261.7± 45.3pg/ml ，实验组明显低于对照组，差异有统计学意义 （P<0.05） ，（见表1）。

表 1 两组血清 NT-proBNP 水平的比较

Tab.1 The level of NT-proBNPin two group

2.2 两组血清 IL-6 水平比较

实验组的血清 IL-6 水平为 11.2±7.5pg/ml ，对照组的血清 IL-6 水平为 23.7±5.6ng/ml ，实验组明显低于对照组，差异有统计学意义 P<0.05} ），（见表2）。

表2 两组 IL-6 水平的比较

Tab.2 The level of IL-6 in two groups

2.3 两组血清 TNF-α 水平比较

实验组的血清 TNF-α 水平为 103.6± 21.5pg/ml ，对照组的血清 TNF-α 水平为 165.7±18.3ng/ml ，实验组明显低于对照组，差异有统计学意义 （P<0.05） ，（见表2）。

表 2 两组 TNF-a 水平的比较

Tab.2 The level of TNF-a in two group

讨论

冠心病是老年人常见疾病，心梗后心衰是常见的并发症，其过程是—个动态、复杂的炎症反应生物学过程，有多种炎性因子以及其他通路参与调节[6，7]。心梗后过度的炎症反应加重心脏重构引起心力衰竭，因此调控心梗后心肌组织的炎症反应有可能成为未来心衰的预防及治疗的重要手段，但现阶段对这个病理过程中炎症反应尚未完全明确，抗炎治疗应用是研究的热点。

磷酸鞘氨醇（S1P）是脂质代谢产物，由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨醇生成，或经由磷酸化 S1P脱磷酸化生成，也可经由磷脂和鞘氨醇被神经酰胺合酶催化生成。S1P 通过与其受体结合发挥生物学效应。S1P 受体包括 5 种亚型（S1PR1-5），分别结合不同的 G 蛋白，其中 S1PRl特异性与 G 蛋白受体的 Gi/o 亚基结合。有研究发现，S1P 结合 SIPR2 后通过激活ERK1/2-MMP-9 促进 AT-MSCs 迁移，通过激活 AKT 抑制 AT-MSCs 凋亡，发挥对心肌梗死的保护作用[8]。还有研究发现缺失SIPR2 和SIPR3 增加了心梗面积，SIPR3-KO 心脏缺血后功能恢复减弱，梗死面积比例增加，证实了该受体的心脏保护作用[9]。

本研究针对心肌梗死时S1PR1 对炎症因子及心功能的影响进行研究，结果显示在腹腔注射 S1PR1 激动剂的实验组中，血清 NT-proBNP 水平（ 103.5±51.7pg/ml ）明显低于对照组的血清 NT-proBNP 水平（ 261.7±45.3pg/ml ），研究结果与以往的研究一致，心肌梗死后2 周给予S1P1 受体激动剂，会减少非梗死区心肌细胞的凋亡并增强心肌功能[10]。同时，在心梗发病过程中促炎和抗炎之间存在不平衡，这种不平衡导致斑块不稳定[11]。发生心肌梗死后大量中性粒细胞进入血管内，释放炎症介质损伤组织和内皮，引起血小板聚集堵塞微血管同时释放缩血管物质加重管腔狭窄，引起相应心肌坏死，因此中性粒细胞增高可以反映炎症程度[12]。在动脉粥样硬化的发生过程中，血管内皮的损伤可使 TNF-a 释放增加，而 TNF-a 又促进 IL-6 的增加，二者协同作用促进Th 增加、Ts 减少，形成免疫复合物沉积于血管内皮，造成血栓形成[13]。我们的研究结果显示了在腹腔注射S1PR1 激动剂的实验中，实验组血清 IL-6（11.2± 7.5pg/ml）和 TNF-α （103.6± 21.5pg/ml ），明显低对照组的血清 IL-6（23.7± 5.6ng/mlpg/ml）和 TNF-α （165.7± 18.3ng/ml），明确了心肌梗死后给予 S1PR1 激动剂可以减轻炎症反应，有利于心功能的改善。

综上所述，在心肌梗死后应用S1PR1 激动剂可以减轻炎症反应，减少心肌损伤，能明显降低NT-proBNP、IL-6 及TNF-α 水平，而且可以促进左心室功能恢复，进而改善心肌梗死预后，值得临床推广应用。

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作者简介]张涛（1977－），男，陕西人，硕士研究生，主任医师， 基金项目：西安市创新能力强基计划-医学研究项目：S1PR1 在心肌梗死后心室重构中的 作用及机制研究（项目编号：22YXYJ0089）