高效液相色谱法在畜产品检测中的应用分析

引言：

畜产品是人获取蛋白质等养分的重要渠道之一，其质量的优劣关乎着消费者的健康情况。近年来频繁曝出兽药残留超标或者非法添加等畜产品安全隐患问题，这给消费者身体状况以及畜牧业的发展都带来了较大的伤害与困扰。高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC），一种现代化、较为成熟有效的分析技术手段，可以针对多种不同的成分进行精准地测定与检测工作，在畜产品的品质安全维护上有着重要的作用意义。

一、高效液相色谱法的特点

高效液相色谱法（HPLC）在畜产品检测中的优势：一是高分辨率，可以有效的分离结构和性质相似的化合物，在检测四环素类抗生素残留时，可以清楚地分离出土霉素、四环素、金霉素等；二是高灵敏度，可以检测痕量物质，对于瘦肉精（盐酸克伦特罗等）的检测限低到 μg/L 甚至 ng/L ；三是分析速度快，相较于传统的分析方法，大大提高了检测速度，适合大规模的检测；四是应用广泛，无论是低分子量的物质，还是高分子量的、热稳定性差的兽药、添加剂、营养成分等，都可以进行准确的检测。

二、高效液相色谱法在畜产品检测中的应用

2. 兽药残留检测

畜禽养殖过程里兽药的使用频率很高，如果管理不当就很容易造成兽药残留超标。高效液相色谱法（HPLC）是一种先进的技术手段，它有着显著的技术优势，在兽药残留检测方面被广泛应用并大力推广。

畜产品安全检测里，高效液相色谱法（HPLC）凭借优秀的灵敏度和特异性，在许多药物残留分析中被广泛使用。四环素类抗生素（土霉素，四环素，金霉素）的测定就包含在内，这些物质曾经被大量用作饲料添加剂，存在于畜牧业生产当中，它们的残留也许会对人类健康带来危险。按照 GB/T 5009.6 - 2003标准，利用 C8 色谱柱并结合特定的操作条件，可以完成肉类样品中四环素类抗生素的高效定量分析，这种办法有着良好的精密度和准确度，是常规检测的关键方法，标样制作时要选用棕色瓶来解决光降解现象。针对氟苯尼考这个重要的兽用抗菌药物，通过改良前处理工艺和色谱参数之后，用乙酸乙酯提取并借助 Waters Xterra ms C8 柱分离，在 224nm 波长下检测，表现出低检出限，良好的线性关系以及高回收率等优点，非常合适肉制品中氟苯尼考残留量的精确测定。

2.2 添加剂检测

畜产品加工期间，合理添加助剂可以显著改善产品质量，然而如果用量过多，就可能会产生安全隐患。高效液相色谱 HPLC 因为有着很强的灵敏度和分析精确度，现在被普遍看作是检测畜产品里助剂残留和含量的主要技术之一。

卡拉胶属于功能性食品添加剂，在肉类原料中天然含量比较少，有些不法商贩为了提升肉制品的重量，改良其持水能力，常常违规加入卡拉胶。为破解这个难题，中国食品药品检定研究院的研究团队采用高效液相色谱 - 质谱联用技术（HPLC - MS），将特定卡拉胶降解产物当作主要分析指标，实验期间，把样品放进 mol / L 盐酸溶液当中，然后在 80^∘C 环境下加热 20 分钟，促使卡拉胶发生化学降解，形成极性大幅加强的寡糖类化合物，再利用亲水性固定相色谱柱来完成分离并定量检测。该方法对猪、在牛羊肉基质中，卡拉胶添加量为 0.2g/kg 时，加标回收率稳定在 90-20% 之间，6 次平行测定相对标准偏差均小于 5% ，该检测方法不仅可以对“注胶肉”进行定性定量分析，而且操作简单、结果准确、指标明确等特点，有望成为解决“注胶肉”问题的技术支撑手段。

2.3 营养成分检测

畜产品中的营养成分含量的准确测定，对评价产品的品质及营养价值有着重要的意义，HPLC 在这方面也有一定的作用。

巴氏杀菌乳中 α - 乳白蛋白和 β - 乳球蛋白检测暂无国标，研究选用高效液相色谱法，WatersXbridgeProteinBEHC4 色谱柱，调节柱温、检测条件彻底分离。酪蛋白沉淀用 40^∘C 稀释样品、调 pH 值，效果最佳；流动相第 阶段洗脱中 0.% 三氟乙酸 - 水溶液体积分数提高到 65% ，兼顾保留时间和分离效果。此方法标准曲线相关系数均为 0.9999，线性良好。α- 乳白蛋白加标200～032mg/L 时，回收率 97.9%～04.0% ，R ⋅SD0.00%～.09% ；β- 乳球蛋白加标 600～4727mg/L 时，回收率 96.%～03.0% ， RSD0.00%～2.23% 。市售样品 6 次重复测定，两者 RSD 分别为 0.48% 、 0.56% ，精密度好，定量限25mg/L ，实验室间结果无显著差异，稳定性好，为相关检测提供参考。

2.4 有害物质检测

畜产品在生产、在加工、储存等环节，可能会有某些有害物质的污染，HPLC 可以用来检测这些有害物质，保证产品的安全。

瘦肉精（盐酸克伦特罗）是 β- 激动剂类药物，可以促进动物生长，提高瘦肉率，但人食用含瘦肉精残留的畜产品后会出现心悸、肌肉震颤等症状。高效液相色谱法是目前我国检测“瘦肉精”的半确证法，适用于热不稳定和强极性的 β- 激动剂及其代谢产物的测定。以赛智科技的 LC-0Tvp 高效液相色谱仪为例，一般仪器配置为等度单泵系统（一个泵，一个检测器），加上进样阀、色谱柱、进样器、色谱工作站和前处理设备。样品处理时，称取一定量的样品粉末于 25ml 容量瓶中，用流动相（ 20mmol 乙酸铵溶液：乙腈 =75：25 ）溶解，通过针式过滤器过滤，采用 C8（4. 6mm*250mm ，粒度 5μ_m ）色谱柱，仪器波长调到 25nm ，流速调到 .0mL/min ，进样量调到20ul 检测。此法快速，特异性好，分辨力高，灵敏度高，检测限低，一般尿液、肉类大约 0.5μg/L ，假阳性率低，可一次性检测多种参数。

三、结论

高效液相色谱法由于自身的优势在畜产品检测中兽药残留、添加剂、营养成分和有害物质的检测中发挥着不可替代的作用，是保障畜产品质量安全的重要技术手段。目前在样品前处理、仪器价格、人员要求等方面还存在一些问题，但是随着与其他技术的联用、自动化智能化和开发新型色谱柱、新型固定相，高效液相色谱法将会不断完善、不断创新，在畜产品检测中发挥越来越大的作用，为人们提供更安全、更优质的畜产品。

参考文献：

[] 张继成 ， 陈娟 ， 栾辉 ， 等 . 超高效液相色谱 - 串联质谱法同步快速测定畜产品中 39 种兽药残留 [J]. 农产品质量与安全 ，2025，（02）：52-59.

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