无菌检验方法在药品生产企业中的应用

摘要：目的：探讨药品生产企业中无菌检验方法的应用。方法将盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液作为实验样品，使用无菌检验.方法加以验证。结果采用实验的方法，来对实验进行证明，可以作为盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液的无菌检验方法。结论在药品生产企业中，应用无菌检验方法能够全面掌握测定方法，对方法的有效性进行准确检验，适合用于试验样品的检验，可以有效预防假阴性和假阳性，是药品生产企业加强质量控制，确保药品安全的保障。

关键词：无菌检验方法；药品生产；应用

现在的药品生产过程中，为了保证药品的生产质量，和生产的药品的安全性，无菌操作已经成为了生产过程中的基本原则，所以现在药品生产企业在进行药品的生产和检验过程中，也需要遵循无菌原则，保证药品生产和检验过程中的无菌操作，保证药品的质量和安全。在药品的生产过程中，无菌检验是- -种比较常用的检验方法，也是检验中的重要原则，所以现代的药品生产企业，在进行药品检验的过程中，必须要加强无菌检验法的应用。

一、药品无菌检验的介绍

无菌检查法，顾名思义，就是对药品缝合线、敷料以及其他适用于药典要求的物品进行的无菌检查，检查其中是否存在病菌或细菌，在无菌检查的过程中，对于检查环境有着相当高的要求，需要a级的洁净度，还需要有比较高效和先进的隔离系统，在整个检验和检查的过程中，要遵循无菌操作的原则，避免发生微生物或其他污染物的感染，一般会使用单向流空气区与工作台面进行检验，按照国家规定的生物制品规程中的无菌检查规程和标准进行检查，防止在检查的过程中，对物品造成细菌或其他生物的污染。进行药品的无菌检验时，由于细菌和有机物的种类和特性都不相同，所以需要制备不同类型的培养基来进行检验，需要对需气菌和厌气菌以及真菌等都进行检验，这就意味着，在检验的过程中需要制备不同类型的培养基。现在比较常见的无菌检验培养基主要包括：真菌培养基、肉汤培养基、琼脂培养基和葡萄糖肉汤培养基，通过这些培养基的无菌检验，大部分的细菌和有机物都可以被检测出来，另外，还可以使用对照用菌液、真菌琼脂以及抑菌实验来进行细菌的检验。

二、资料与方法

（一）药品和仪器

1、药品选择

盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液，规格.为100ml，0. 2g，生产批号为2009268952。

2、检验仪器智能集菌仪（生产企业；杭州泰林生物技术设备有限公司；型号：HTY-II）；震荡仪（型号： HTY-K）和集菌培养器；生化培养箱（生产企业广东医疗器械厂；（型号：LRH-250-II）。

3、实验菌株由中国药品检验总所提供的白色念珠菌（真菌）、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉菌、嗜肉菌、绿脓杆菌、产芽孢梭菌等。

（二）检验方法

1、制备阳性对照管 每管3瓶，体积为50^ 100ml，培养基为100ml/管。选择3套完全密封的一次性集菌培养器，将会培养基输入其中一管后立刻夹紧，作为阳性对照管。

2、制备第1组实验管采用薄膜法，将3瓶本药品过滤到另一个管中，然后输入相同的培养基，而且两个管中输入的实验菌<100CFU'"。

3、制备第2组实验管与第 1组实验管的制备方法相同，采用薄膜法将3瓶本药品过滤到另一个管中，冲洗剂选择pH值为7. 0，即中性的氯化钠蛋白胨缓冲液，进行3次冲洗，每输入100ml相同的培养基之后，两个管中输入的实验菌应<100CFU。

4、制备第2组实验管采用薄膜法将3瓶本药品过滤到另一个管中，冲洗剂选择pH值为7.0，即中性的氯化钠蛋白胨缓冲液，进行5次冲洗，每输入100ml相同的培养基之后，两个管中输入的实验菌应< 100CFU。

5、制备阴性对照管在另外两个管的集菌器中，分别输入硫乙醇酸盐液体培养基，和改良之后的马丁培养基。

（三）观察指标

上述所有的实验管，都应该严格按照相关规范中的温度要求，培育3～5天，对白色念珠菌（真菌）、铜绿假单胞菌、生孢梭菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉菌、嗜肉菌、绿脓杆菌、产芽孢梭菌等实验菌株的生长情况进行观察。

（四）统计学分析

采用SPSS19.0 进行统计分析，将计数资料录入Excel表格。

三、检测结果

其中第一组实验管也就是阳性对照组，通过观察可以发现，霉菌的生长比较正常，而细菌、嗜肉菌和其他菌类都无法生长，这就说明了，药品对于，无菌检验的结果会构成干扰，在一定程度上起到了抑菌的作用，所以在使用这种液体之前，需要先用冲洗剂进行冲洗，排除干扰。而第二组实验组，可以观察到不同的细菌和真菌在培养基中的生长情况不同，比如绿脓杆菌在两天内就会生长，而食肉菌则在五天后出现，其它的细菌和真菌则始终无法生长，这样可以看出，药品的抑菌功能仍然存在，因此可见，第二组实验组中使用的冲洗剂仍然没有将药品的抑菌效果排除干净，所以需要增加冲洗剂的使用量。而第三组的实验组可以发现，在相同的温度培育下，14 天内每天都进行观察，阳性的实验管内生长状况比较良好，因此可见，其中的药品已经满足了无菌检验的要求，可以被用于盐酸左氧氟沙星注射液的无菌检验。

四、讨论

根据上表对每-组实验管的结果进行分析，结果发现①在第1组实验管中，只有白色念珠菌和黑曲霉菌能够正常生长，但是铜绿假单胞菌、生孢梭菌、金黄色草芽孢杆菌等都无法生长。这一结果表示，盐酸左氧氟沙星氯化钠注射液对细菌的抑制功能，可能会对无菌检验的结果造成一定的影响，可以使用适量的冲洗剂进行清洗，排除干扰。②在第1组实验管结果的基础上，培养2天后，绿脓杆菌开始生长，而嗜肉菌则在培养5天后才开始生长，其他菌株仍然无法生长，说明药品本身抑菌功能对检验结果的影响并没有彻底消除，需要进一步增加冲洗液的使用量和冲洗的次数。③第3组试验管，严格按照要求的温度进行培育，2周内，每天都进行观察，而且实验中需要的品管都已澄清，阳性的实验管良好生长，此时判定用以实验的药品满足规定。利用试验确立的方法证明试验，能够当作盐酸左氧氟沙星注射液的无菌检验法。无菌检验方法的主要目的在于对试验样品在特定实验条件下是否具有抑菌活性，通过在实验中采取积极有效的方法避免可能对结果造成不利影响的因素，防止检验的假阴性和假阳性结果的出现。中国于2005年的10月份针对药物在实施无菌以及微生物的限度的检测时颁布了国药典发[2005]第98号文件规定检验药物应当针对其检测方法进行证明。否则不允许出

具达到中国药典2005年版的要求的意见。无菌检验方法的主要目的在于对试验样品在特定实验条件下是否具有抑菌活性，通过在实验中采取积极有效的方法避免可能对结果造成不利影响的因素，防止检验的假阴性和假阳性结果的出现。总之，无菌检验方法的应用可全面掌握测定方法，准确检测方法的有效性，并适用于试验样品的检验，有利于企业对药品的质量控制，确保了药品安全。

结束语：

综合上述分析可知，在药品生产企业中，应用无菌检验方法能够全面掌握测定方法，对方法的有效性进行准确检验，适合用于试验样品的检验，可以有效预防假阴性和假阳性，是药品生产企业加强质量控制，确保药品安全的保障。在我国的药品生产企业工作中，无菌操作是最基本的原则，也是药品生产质量的重要保障，因此，在现在的药品生产企业检验工作中，需要加强无菌检验方法的应用。

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