布洛芬高良姜油微乳凝胶的制备与评价

布洛芬具有解热、镇痛、抗炎作用，是非甾体抗炎药中作用最强的一种，对慢性钝痛效果显著，如头痛、痛经等。但其对胃肠道有较大的刺激性，且该药的消除半衰期短，需频繁给药[1]。因此，IBU适合开发成经皮给药制剂（TDDS），经皮给药可以避免药物对胃肠道的刺激，有更长的作用维持时间等优点。然而，由于皮肤角质层的屏障作用，很难通过经皮给药途径获得FP的有效血药浓度。在TDDS中使用透皮吸收促进剂是最常用的方法。中药挥发油是一大类性质优良的PE[2]，具有透皮吸收促进能力强，安全性高，药效协同等优点。

微乳是由水相、油相、表面活性剂按比例自发形成的热力学稳定的溶液体系，可以增加药物的透皮速率，适合做经皮给药制剂的载体。凝胶剂具有黏附性佳、易洗脱等诸多优点。ME与gel成功的结合了两者的优点，是一种良好的经皮给药剂型[3]。因此，本课题选用GEO作为油相和PE开发IBU透皮制剂，制备IBU-GEO-ME gel，同时测定IBU和GEO中主要成分1，8-桉叶素的体外透皮吸收行为。

1实验

1.1药材与试剂

中药饮片高良姜（亳州市甄药源中药科技有限公司）；布洛芬（南京春秋生物有限公司）；布洛芬（美国 Sigma 公司）；1，8-桉叶素（福建森美达生物科技有限公司）；无水乙醇（亿鑫化学科技（苏州）有限公司）；乙腈、甲醇（色谱纯，南京化学试剂股份有限公司）；丙二醇（分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司）；异丙醇（分析纯，南京化学试剂股份有限公司）；氮酮（国药集团化学试剂有限公司）;其他试剂均为分析纯（南京化学试剂有限公司）。

1.2动物

雄性 SD 大鼠，体重（200±20） g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。

1.3仪器

LC20-AT 型高效液相色谱仪（日本岛津，SPD-20A 型检测器，SIL-20A型自动进样器 ）；BAS-124S 型分析天平（德国赛多利斯股份有限公司）；TK-12D 透皮扩散仪（上海锴凯科技贸易有限公司）；台式恒温振荡器（上海精宏实验设备有限公司）；ATR-500/M型傅里叶变换衰减全反射红外光谱ATR-FTIR（JASCO公司）

2方法与结果

2.1GEO的制备及其性质研究

2.1.1GEO的制备及理化性质测定

称取500g高良姜饮片，粉碎至24目，加入圆底烧瓶中，加入10倍量的蒸馏水，连接挥发油提取器、冷凝管，自冷凝管上端加蒸馏水至溢出挥发油提取器支口。浸泡1h，加热保持微沸5h，至挥发油的量不再增加时，停止加热。室温下冷却，加入无水硫酸钠适量离心脱水，4℃下棕色玻璃瓶避光密封保存备用[4]。

2.1.2GEO的促透性质研究

采用傅里叶全反射红外光谱法（ATR-FTIR）研究GEO的促透作用。将大鼠皮肤切成约1cm2的小片，置于5％GEO，5％1，8-桉叶素或5％氮酮溶液中，溶剂为丙二醇：异丙醇（3：7）。以溶剂处理的为溶剂组，未经处理的作为空白组。37℃水浴下放置36h，然后用蒸馏水洗涤处理过的皮肤样品并用滤纸擦干。使用ATR-FTIR光谱仪获得皮肤样品的红外光谱。红外检测条件：分辨率2cm-1，平均扫描64次，扫描范围650-4000cm-1。不同PE处理大鼠皮肤后红外图谱参数见表2。

ATR-FTIR能提供角质层脂质的信息。发生在2850 cm-1和2920 cm-1附近的亚甲基对称及不对称吸收振动峰（VsCH2与VasCH2）可反映出角质层脂质疏水烃链排列的有序度，当此二峰位发生蓝移（即向高波数移动）时表示脂质烃链有序度降低，皮肤通透性增强，位移越大，表示干扰能力越强。结果表明，高良姜油和其主要成分1，8-桉叶素可以干扰角质层脂质排列且GEO干扰作用强于常用的化学PE氮酮和常用的萜类PE1，8-桉叶素。

2.2IBU-GEO-ME的制备及性质表征

2.2.1IBU-GEO-ME的制备

根据文献，采用水滴法，以吐温80作为表面活性剂，乙醇作为助表面活性剂，表面活性剂-助表面活性剂（Smix）比例为2：1，GEO作为油相，油相：表面活性剂-助表面活性剂为3：7，制备ME。

精密称定 100mg IBU，用 1.556g 无水乙醇（药物的溶剂，助表面活性剂）溶解后，加入 3.114 g 吐温 80（表面活性剂），搅拌均匀。精密称定 2g GEO加入上述混合液中，搅拌均匀。在 25 ℃条件下，缓慢加入3.334g 纯水，边加边搅，直至形成外观呈淡黄色的澄清透明均一液体，即得IBU-GEO-ME，FP含量为 10 mg·g-1，GEO含量为 200mg·g-1。

2.2.2HPLC法同时测定IBU与1，8-桉叶素

色谱条件：汉邦C18反相色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm）。流动相：乙腈：水（磷酸调pH为2.5）=57：43，流速：1mL·min-1，检测波长203nm，柱温30℃，进样体积：10µL。

IBU标准曲线方程为：Y = 82785X + 79302（R2 = 0.9997），IBU在0.1～105.00 µg·mL-1范围内线性良好；1，8-桉叶素标准曲线方程为：Y = 1126.8X - 7107.3（R2 = 0.9999），1，8-桉叶素在10.09～203.12 µg·mL-1范围内线性良好。

2.2.3离体皮肤的制备

取 SD 大鼠，称重，麻醉后除腹部毛，于12h后脱颈处死，并立即剥离腹部皮肤，去除皮下脂肪，以PBS 溶液漂洗干净，-20℃保存备用。

2.2.4IBU-GEO-ME gel的制备

IBU-GEO-ME gel：称取卡波姆粉末0.4g，将其均匀散在30ml纯水中，待其充分溶胀后，滴加三乙醇胺调节pH至6.6，后加纯水至40.0g，均匀搅拌，为空白凝胶基质。取按照“2.2.1”下制备的IBU-GEO-ME按照1：1比例与空白凝胶均匀混合即得IBU-GEO-ME gel，IBU含量5mg·g-1，GEO含量100 mg·g-1 。

IBU溶液：精密称取FP25mg，置于5ml容量瓶中，丙二醇：异丙醇=3：7定容，配制成5mg·ml-1IBU溶液。

2.2.5体外透皮试验

离体皮肤解冻，PBS 中水合 1 h，固定于 Franz 扩散池，角质层朝上，有效扩散面积为 3.14 cm2。以 20%乙醇-PBS 为接收液，37℃ 超声脱气 30 min 后加入到含转子的接收池。IBU-GEO-ME gel（IBU含量为 5mg·g-1）200mg、 IBU溶液（溶剂为丙二醇：异丙醇=3：7， IBU含量为 5mg·ml-1）200ml 于供给池中，每组平行 5 份，37 ℃避光下透皮吸收24h，转子转速为 500 r·min -1。分别在不同时间点取接收液 0.3mL，并立即补充等体积等温的新鲜空白接收液。接收液按照“2.2.2”项下 色谱条件测定IBU、1，8-桉叶素计算单位面积累积渗透量，计算各时间点下单位面积累积透过量Q，计算公式如下所示：将Q对t作图，得到IBU的透皮吸收曲线，见图1。

同时还测定了IBU-GEO-ME gel组中1，8-桉叶素体外透皮吸收行为。1，8-桉叶素在8小时内快速透过大鼠皮肤，累积透过率为25%。

3结论

GEO具有显著的透皮吸收促进作用。IBU采用适宜剂型和中药挥发油作为PE联用，IBU-ME gel是一种可用于经皮给予非甾体抗炎药物（例如IBU）的有前途的制剂。

参考文献

Jamali F，Collins D S，Berry B W，Molder S，Cheung R，McColl K，Cheung H. Comparative bioavailability of two flurbiprofen products： stereospecific versus conventional approach.[J]. Biopharmaceutics & drug disposition，1991，12（6）.

陆姗姗，赵玉荣，姚俊宏，任略，李钰，陈军.中药挥发油透皮吸收促进剂制剂技术的研究进展[J].中草药，2018，49（10）：2477-2481.

冒玉娟，张乐，马佳宁.微乳凝胶剂的研究进展[J].山西医药杂志，2019，48（03）：316-318.

蒋秋冬，杨文国，蔡皓，马敏，张会，刘培，陈军，段金廒.透皮促渗中药挥发油的化学成分与中药药性关联性研究[J].中国中药杂志，2016，41（13）：2500-2505.

基金项目：天津市市级大学生创新创业训练计划项目（2023108590018）