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兽医实验室检测在动物疫病防控工作中的应用

作者

唐杰华

邵阳市动物疾病预防控制中心 湖南省邵阳市 422000

引言:

动物疫病的流行呈现出全球化、复杂化的趋势,如非洲猪瘟、高致病性禽流感等疫病的暴发,给畜牧业生产和公共卫生安全带来了严峻挑战,兽医实验室检测作为疫病防控的关键环节,其作用日益凸显。通过血清学、病原学、分子生物学等检测技术,实验室不仅能够快速识别病原体,还能追溯疫病来源、评估传播风险,为制定精准防控措施提供数据支持,当前我国基层兽医实验室仍面临设备不足、技术人才短缺等问题,制约了检测能力的充分发挥。

1.应用PCR 技术快速检测非洲猪瘟病毒核酸

兽医实验室检测在动物疫病防控中发挥着关键作用,其中 PCR(聚合酶链式反应)技术因其高灵敏度和特异性,成为非洲猪瘟(ASF)病毒核酸检测的核心手段。非洲猪瘟是一种高度接触性传染病,传播速度快、致死率高,对全球养猪业构成严重威胁,传统的病毒分离和血清学检测方法耗时长、效率低,难以满足疫情快速响应的需求,而 PCR 技术能够在数小时内完成病毒核酸的扩增和检测,大幅缩短诊断周期,为早期疫情处置争取宝贵时间。实时荧光定量 PCR(qPCR)技术的应用进一步提高了检测的准确性和自动化水平,可同时检测多个样本,并定量分析病毒载量,为疫病流行趋势评估提供科学依据。

随着分子生物学技术的发展,PCR 在非洲猪瘟检测中的应用不断优化和完善,多重PCR 技术可同时检测非洲猪瘟病毒和其他常见猪病病原,如猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等,提高了检测效率并降低了成本。数字PCR(dPCR)技术的引入进一步提升了低病毒载量样本的检出率,在潜伏期感染或康复猪只的监测中具有独特优势。

2.采用 ELISA 方法筛查禽流感病毒抗体水平

ELISA(酶联免疫吸附试验)技术因其高通量、高灵敏度和操作简便的特点,成为筛查禽流感病毒抗体的重要手段,禽流感病毒血清型复杂,传播范围广,对家禽养殖业和公共卫生安全构成重大威胁。传统的病毒中和试验虽然特异性强,但操作繁琐且耗时长,难以满足大规模监测需求,而 ELISA 技术能够快速检测血清中的特异性抗体,适用于禽群的免疫效果评估和疫情追溯。间接 ELISA 和阻断ELISA 是两种常用方法,前者通过检测抗体与包被抗原的结合反应判断感染状态,后者则通过竞争抑制原理区分疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,为疫情防控提供更精准的数据支持[1]。

随着免疫学技术的进步,ELISA 在禽流感抗体检测中的应用不断优化,例如重组蛋白技术的应用提高了抗原的纯度和稳定性,减少了非特异性反应,使检测结果更加可靠。多重 ELISA 技术的发展使得单次检测可同时筛查多种血清型抗体,显著提升了监测效率,ELISA 技术结合流行病学调查,能够快速评估禽群的免疫保护水平,为疫苗免疫程序的制定和调整提供科学依据,ELISA 检测还可用于野生鸟类禽流感病毒的监测,为跨物种传播风险预警提供重要数据。

3.实施细菌分离培养与药敏试验指导临床用药

细菌分离培养与药敏试验是指导临床合理用药的关键技术手段,当养殖场出现疑似细菌性感染时,通过采集病料进行细菌分离培养,不仅能够明确致病菌种类,如大肠杆菌、沙门氏菌或链球菌等,还能为后续的精准治疗提供病原学依据。传统的细菌培养方法虽然耗时较长,但仍是鉴定细菌的"金标准",其优势在于能够获得纯培养物用于进一步分析。药敏试验则通过测定细菌对不同抗生素的敏感性,为临床用药提供科学指导,有效避免盲目使用抗生素导致的治疗失败或耐药性问题,兽医实验室常采用纸片扩散法或微量肉汤稀释法进行药敏试验,结合 CLSI 或 EUCAST 标准判读结果,确保检测的规范性和可靠性。

现代兽医实验室通过优化培养基成分、改进培养条件等方法,不断提高细菌分离的成功率,尤其对营养要求苛刻或生长缓慢的病原菌,自动化药敏分析系统的引入大大提高了检测效率,部分设备可在数小时内完成检测并出具报告,为急性感染病例争取宝贵的治疗时间。实验室还将药敏试验结果与流行病学数据相结合,定期发布区域性的耐药性监测报告,指导养殖场调整用药策略,延缓耐药菌株的出现和传播。

4.运用免疫荧光技术诊断犬瘟热病毒抗原

免疫荧光技术(IFA)在犬瘟热病毒(CDV)抗原检测中展现出独特的诊断价值,为这种高度接触性传染病的早期确诊提供了可靠的技术支持,犬瘟热作为犬科动物的重大疫病,其临床症状复杂多样,常与呼吸道疾病、神经系统疾病等混淆,仅凭临床表现难以准确诊断。免疫荧光技术通过荧光标记的特异性抗体与病毒抗原结合,可在感染早期直接从眼结膜、鼻液或血液等临床样本中检出病毒抗原,大大缩短了诊断窗口期,直接免疫荧光法操作简便、耗时短,通常在采样后 2-3 小时内即可获得结果,特别适合临床急诊病例的快速筛查[2]。免疫荧光技术在犬瘟热诊断中的应用正随着科技发展而不断创新和完善,多重免疫荧光技术的开发使得单次检测可以同时筛查犬瘟热病毒与其他常见犬类病原体,如犬细小病毒、犬腺病毒等,显著提高了诊断效率。自动化荧光显微镜和图像分析系统的引入,不仅减少了人为判读的主观性,还实现了检测结果的数字化存储和分析,便于建立长期的疫情监测数据库。

5.血清学在动物实验室检测中起到的作用

血清学检测在动物实验室检测中发挥着至关重要的作用,主要用于动物疫病的诊断、免疫效果评估、群体健康监测及流行病学调查。通过检测血清中的特异性抗体或抗原,血清学方法能够快速、准确地诊断病毒性、细菌性和寄生虫性传染病,如非洲猪瘟(ASF)、口蹄疫(FMD)、禽流感(AI)和布鲁氏菌病等。酶联免疫吸附试验(ELISA)、中和试验(SN)、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制试验(HI)等血清学技术,因其高灵敏度、高特异性和可批量操作的特点,成为实验室常规检测手段。在疫苗免疫效果评估中,血清抗体水平检测可客观反映动物群体的免疫保护状态,指导科学免疫程序的制定。此外,血清学监测能早期发现隐性感染或亚临床感染动物,防止疫病在养殖场内的扩散,并为疫病净化提供数据支持,在进出口检疫中,血清学检测是证明动物无特定疫病的重要依据,保障国际贸易安全。

结语:

兽医实验室检测是动物疫病防控工作中不可或缺的技术手段,其发展水平直接关系到疫病防控的成效,随着检测技术的不断创新和应用,实验室检测在疫病监测、诊断和预警中的作用将进一步增强。应继续加大对兽医实验室的投入,提升检测设备的现代化水平,加强专业技术人才培养,同时推动检测技术的标准化和信息化建设,还需加强国际合作,共享疫病检测数据和防控经验,共同应对全球动物疫病挑战。

参考文献:

[1]李芳,陆刚,陈芳. 兽医实验室检测在动物疫病防控中的应用 [J]. 北方牧业, 2025, (10): 15.

[2]邓开永. 兽医实验室在动物疫病防控中的作用与发展 [J]. 吉林畜牧兽医, 2024, 45 (10): 133-135.