无菌药品( 非最终灭菌工艺) 无菌控制的研究

前言

对于无菌药品而言，药品的无菌性是除了药效以外，另一项至关重要的要求。受微生物污染的药品用于患者体内，将对患者产生不可估量的危害。在无菌药品生产过程中，若没有最终灭菌这道工序的保障，则药品的无菌性将受到非常巨大的挑战，它包括产品在生产过程中的环境控制、产品内包材的无菌保证、药液的除菌手段、药液灌装及密封的生产操作等，这些条件对无菌工艺的影响较大。

第1 章无菌药品的简述

1 概述

无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，包括注射剂、眼用制剂等。无菌药品的生产过程需对微粒、微生物和细菌内毒素等污染进行严格控制，在成品检测时应进行无菌检查，确保产品的无菌性。本文针对如何进行无菌工艺关键控制点的把控进行研究，为非最终灭菌制剂的无菌性提供保障。

第2 章无菌生产的要求

无菌产品在生产过程中，需要对洁净区环境进行控制、产品内包材许进行灭菌、药液进行除菌过滤、包材 / 部件的转移和安装不能够被污染、药液灌装及密封的生产操作不能污染产品等。以下将对生产过程的各控制点进行说明。

1.1 环境控制

1.1.1 消毒剂消毒：消毒剂的选择应包含能够杀灭细菌、霉菌、孢子等，且需考虑消毒剂的残留对洁净区墙面 / 地面材质、设备表面材料的腐蚀性，且用于 A/B 级洁净区的消毒剂应进行过滤操作，或能够保证其无菌性。消毒剂应经过验证，消毒效力需达到至少下降3 个对数级的微生物，测试需包含洁净区的所有材质。

1.1.2 空间消毒 / 灭菌：目前常用的空间消毒法包括臭氧消毒和甲醛熏蒸消毒，对空间内浮游菌和沉降菌具有显著的消毒效果。空间灭菌通常使用过氧化氢干雾灭菌法，它能够杀灭包含芽孢在内的微生物，达到使微生物下降6 个对数级的要求。

1.2 人行为规范员要求

在无菌药品生产中，人是最大的污染源。操作人员在快步行走时产生的微粒远大于人员静止时产生的微粒，故在洁净区内人员应当缓慢行走，且双手不能接触地面，也不应将人员穿着或手套的任何部位触碰药液、包材、设备无菌组件及关键表面等，人员操作不得在产品容器上方。所有在B 级掉落在地上的物品非必要不得捡起，在生产结束后进行处理。

1.3 非最终灭菌制剂配制要求

1.3.1 过滤方法

对于非最终灭菌产品，一般采用两级除菌过滤的模式，确保其无菌性。两级过滤通过两个 0.2μm 的过滤器进行串联，过滤器在使用前后必须检测滤芯完整性，保证产品的无菌性。若完整性检测失败，需查明原因，必要时产品不得放行。

1.3.2 配液工序的中间产品控制要求

$$ 细菌内毒素水平控制：产品生产工艺中无去除细菌内毒素的手段，故须对原辅料的验收进行细菌内毒素的控制，另对产品直接接触药液的包材进行清洗和去热原的操作，通常使用高温去热原法，保证制剂产品质量。

 微生物水平控制：除菌过滤对于非最终灭菌产品至关重要，故对于过滤前的微生物水平需严格控制，在除菌过滤前的中间产品的微生物限度标准通常为 10cfu/100ml 。

第3 章无菌工艺模拟试验

1 介绍

无菌工艺模拟试验又称培养基模拟灌装试验，指采用适当的培养基或其他介质，模拟制剂生产中无菌操作的全过程。无菌工艺模拟试验应当尽可能模拟常规的无菌生产工艺，包括所有对无菌性有影响的关键操作，即生产中可能出现的各种干预和最差条件。

2 要求

2.1 基本要求

模拟灌装数量应确保可以完成模拟方案中要求的各种干预活动，批量应考虑产品的生产批量，使用括号法，选择最大批量进行模拟。容器中培养基灌装体积应考虑适宜微生物生产的需要和容器内表面覆盖的要求。

2.2 干预

在培养基模拟灌装期间应模拟所有类型的干预动作，并规定干预频次和干预时间，包括固有干预和可预见的纠正性干预动作。干预后的样品应尽可能的进行全培养，可对干预干扰的样品进行标记，若出现异常可用于原因调查，对于不培养的样品应予以记录并评估其合理性。如在干预发生前已经密封，在日常生产中按规定不需要剔除的产品，模拟试验时也应进行培养。

2.3 模拟时限

模拟的时限应包含应考虑实际生产操作过程中房间/ 设备清洁消毒放置的最长时间，内包材 / 无菌组件 / 无菌管道灭菌后放置的最长时间，产品生产的最长时限等。

2.4 培养

生产的培养基样品除日常剔除的样品及密封缺陷的样品不进行培养外，其他应全培养，包括外观缺陷、灌装装量异常的样品。在培养前，对模拟灌装的样品进行颠倒、轻摇使培养基接触所有内表面，倒置和正置个培养7 天，整个培养期间应连续监控培养温度。

2.5 结果判定

培养结束后，应对所有模拟灌装产品全部进行检查，确保样品数量与生产一致。若所有样品的培养结果为阴性，则表示无菌工艺模拟试验成功。若出现阳性结果，应对样品进行调查，从样品的完整性、干预操作等方面进行，若无法调查出根本原因，应对生产工艺过程的无菌控制开展全面的系统性评估，根据评估结果确定是否重新进行模拟试验。

结论

无菌工艺生产过程中的操作作为非最终灭菌制剂无菌性最为关键的一个控制过程，与每一位患者的用药安全息息相关，重要性不言而喻。而每批生产的产品无法进行每件全检，故无菌工艺模拟试验以最差条件进行，每次的定期模拟试验也是对该生产线，生产工艺的一种检验，只有产品日常的生产操作在无菌工艺模拟试验的试验范围内，无菌工艺模拟试验的成功才能成为加大产品无菌性概率的一种更有效的证明。

参考文献

[1] 卫生部令第79 号公布 . 药品生产质量管理规范（2010 年修订）.第二版，2011 年3 月1 日起施行

[2] 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 . 第十二版 ， 北京 ， 中国医药科技出版社， 2025 年出版

[3] 张爱萍，孙成泽主编 . 药品 GMP 实施指南·无菌药品 . 第二版 ， 北京 ，中国医药科技出版社， 2023 年出版