基于HPA轴的马齿苋抗抑郁作用研究

课题或基金项目：大学生科技创新创业训练计划项目（S202311439019）

[摘要]  目的：通过检测马齿苋提取物对于小鼠血清中下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CORT）含量的影响明确马齿苋抗抑郁机制。方法：慢性温和不可预知应激（CUMS）造模方法建立小鼠抑郁症模型，糖水偏好度实验作为造模成功的依据。结果：马齿苋低、中、高剂量组中ACTH、CRF和CORT的含量均与模型组无显著差异（P>0.05）结论：马齿苋的抗抑郁作用与HPA轴无关。

[][关键词]  马齿苋；抗抑郁；HPA轴

抑郁症，是一种非常高发且常见的精神类疾病[1]，此病症患者的年龄段也较为广泛，主要特征是患者会伴随着长期的情绪低落，更为甚者可能会产生自杀、妄想等各种精神疾病症状。

马齿苋（Portulaca oleracea L.）是马齿苋科马齿苋属的一种较为常见的草本植物，具有多种化学成分和药用价值[2]。其针对肝郁气滞有显著的疗效，对于神经性的疾病也有改善作用[3]。

1试验材料

1.1 试验材料和试剂

1.2  试验仪器

2试验方法

2.1 试验药物的制备

精密称取马齿苋粉末100g至1000ml的圆底烧瓶中，加入600ml浓度为75%的乙醇[4]，使用回流提取法（Reflux extraction）提取马齿苋粗提液。

2.2  小鼠CUMS抑郁模型的建立

将48只雄性小鼠按照简单随机化法分成6组分别为：空白组、模型组、阳性对照组、马齿苋低剂量组、马齿苋中剂量组、马齿苋高剂量组，每组8只小鼠，适应性饲养7d。适应饲养结束后从第一d开始对小鼠施加不规律的温和刺激制作抑郁症模型，具体方法如下[5]。

2.3  实验分组

采用灌胃给药的方式，每日灌胃1次，连续给药14d，本实验分组情况如表4所示。

2.4 样品处理

给药14d结束后，通过眼眶采血的方式从给药成功的小鼠身上采集血液样本。血样采集完后将所有样品小心放入4℃离心机内（3000rpm，10min），等待彻底分离出血清。

2.5  血清中CORT、ACTH、CRF含量的检测（ELISA）

按照说明书操作Elisa试剂盒（96孔），用多功能微孔板检测仪（Tecan lnfinite 200pro）检测CORT、ACTH、CRF在小鼠血清中的含量。

2.6  统计学的处理方法

本次实验用spss26.0分析软件对最后的结果进行统计分析。

3 实验结果

3.1  马齿苋提取物对CUMS小鼠糖水偏好度的影响

如表5所示即为糖水偏好度的对比数据结果，28d造模后，与空白组比较，模型组糖水偏好度显著下降（P<0.05），在给药14d后数据显示给药组与模型组分别相比差异显著（P<0.05），表明给药组小鼠的糖水偏好度有所回升，说明马齿苋具有明显的抗抑郁作用。

3.2 小鼠血清中的指标检测

表6显示的实验结果为给药14d后马齿苋提取物对小鼠血清中CORT、ACTH和CRF含量的影响。阳性组与模型组比较，差异显著（P<0.05）。而马齿苋低、中、高剂量组与模型组比较，无显著差异（P>0.05），说明马齿苋提取物在小鼠血清中的CORT、ACTH和CRF无显著影响。

结  论

实验采用慢性不可预知温和应激法（CUMS）来建立实验动物模型，结果显示在连续不间断造模28d后，小鼠的糖水偏好度产生了明显变化（P<0.05），证明本次造模成功。在给药14d后，从糖水偏好度实验中可知，马齿苋改善了小鼠的行为学指标，起到了抗抑郁的作用。最后采用酶联免疫检测法检测CORT、ACTH和CRF的含量，结果显示CORT、ACTH和CRF这三个指标中，马齿苋低、中、高剂量组与模型组分别相比均无显著差异（P>0.05）。由此可知马齿苋提取物具有显著的抗抑郁效果，但是马齿苋提取物抗抑郁作用的靶点不在HPA轴中。 本次在实验马齿苋抗抑郁作用方面基本排除了HPA轴这个靶点，为马齿苋抗抑郁的后续研究提供了一定的参考价值。

参考文献

[1]王菠.HMGB1在慢性应激致动物抑郁样行为中的机制研究[D].2019.影响健康。

[2]周亚丽.马齿苋的药理作用与营养保健价值[J].承德医学院学报，2011， 28（01）：88-89.

[3]alileh J ，Mahboobeh R G .Ameliorative effects of Portulaca oleracea L. （purslane） and its active constituents on nervous system disorders： A review.[J].Iranian journal of basic medical sciences，2023，26（1）：12-12.

[4]李伟，赵浩男，杨星星，等.Box-Behnken效应面法优化马齿苋中总黄酮提取工艺[J].泰山医学院学报，2020，41（02）：94-96.

[5]徐德峰，宓为峰，张素贞，等.巴戟天寡糖抗抑郁作用机制研究[J]中国临床药理学杂志，2015，31（15）： 1539-1542.

作者简介：成燃虹（2001—），女，本科，研究方向中药资源与开发。

*通讯作者：常丰华（1984—），男，硕士，讲师，主要从事中药药理作用及功效研究。E-mail：759094367@qq.com