微生物检验需要注意什么?
易辉
成都市温江区人民医院 四川成都611130
微生物是指包括细菌、病毒、真菌以及一些小型原生动物等在内的生物群体。微生物广泛存在于自然界的各个角落,有些对人体有益,比如肠道菌群,有些对人体有害,比如病原微生物。因此,微生物的检验显得尤其重要,与人类的生命健康息息相关。那么,微生物检验过程中需要注意什么呢?
——微生物检验的意义
第一,鉴定病原微生物。微生物检验可明确病原微生物的种类及数量,为感染性疾病的诊断和治疗提供可靠依据。例如,临床上根据微生物检验结果确定呼吸道感染是细菌或病毒,指导医生选择抗生素或抗病毒药物治疗。
第二,抗生素敏感性测试。微生物检验可确定病原微生物对特定抗生素的敏感性,如此医生便可以选择最为有效的药物治疗感染,避免不必要的抗生素应用,减少滥用抗生素现象,控制抗生素耐药性的发展。
第三,监测医院感染。微生物检验可监测医院感染的发生及传播情况,对患者、环境以及医疗设施进行微生物监测,可及时发现并控制感染源,降低医院感染风险。
第四,保证食品安全。微生物检测可用于检测食品中的致病微生物,为食品安全提供保障,预防食物中毒事件。
——微生物检验的注意事项
(1)样本选择及采集。选择合适的样本进行微生物检验,例如尿液、血液、呼吸道分泌物和创面分泌物等。常用采样器有玻璃器皿、取样筐、取样勺、取样袋、电子秤等,保证其无菌性,不同采样器采取不同方法消毒,如取样筐用75%酒精喷洒消毒,玻璃器皿用干热灭菌方式灭菌,取样袋先酒精擦拭再用紫外灯照射消毒。标本采集过程中严格执行无菌操作原则,避免样本被污染,一般要求取样前及做样前先洗手再消毒。
(2)样本保存及运输。样本采集后及时送至实验室检验,并根据不同的样本采取不同的方法合理保存,如冷冻保存、冷藏保存等。冷冻样品要求放置于-15℃以下的冰箱或者冷藏库中保存,冷却和易腐样本一般放置于0-4℃冰箱或冷却库中保存,其他样本通常是放置于常温冷暗处保存。
(3)控制实验室环境。实验室需具备适宜的环境条件,包括温度、湿度、通风等方面。对于大环境(房间)做样时,窗户和空调需关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,若在原来的原料微生物检测室做样,定期开启紫外灯,对房间进行杀菌处理。对于小环境(生物安全柜),检验前紫外灯照射30分钟,用消毒剂擦拭生物安全柜的内表面,工作结束后,安全柜继续运行至少3分钟以完成“净化”过程,移出柜内物品前用消毒剂擦拭,尤其是霉菌,检验结束后擦拭生物安全柜内壁及台面。
(4)选择适宜的检测方法。根据不同微生物类型及疾病情况,选择不同的检测方法,目前微生物检验的常用方法有培养法、免疫学方法、分子生物学技术等方法。其中,培养法是一种比较传统的微生物检测方法,通过将样本接种于适合特定微生物生长的培养基上,观察菌落的形成,识别和计数微生物,可提供微生物的生长特性信息,但是其耗时长,无法检测难以培养的微生物。免疫学方法如免疫荧光、免疫沉淀、酶联免疫吸附法,基于特异性抗体与抗原结合的原理,快速检测样本中特定微生物的存在。聚合酶链式反应、实时定量PCR等分子生物学技术可直接从样本中扩增,或测定特定的DNA或RNA序列,其特异性高,灵敏度高,尤其适合检测低浓度或难以培养的微生物。
(5)个人防护。微生物检验时,检验人员需做好个人防护,佩戴好手套、口罩等防护用品,降低感染风险。进入无菌室前用肥皂洗手,用75%酒精棉球擦拭双手。在实验室工作区内不得进食、饮水、吸烟、化妆以及处理隐形眼镜,避免感染。
(6)规范微生物的培养。微生物培养过程中随时监控培养箱的温度,保证在适宜温度下培养。同时,按照《微生物检验规范》的要求及时观察检验结果,发现异常及时分析原因并反馈。需强调,大肠菌群在伊红美兰琼脂平板上挑取菌落时一定要选择典型菌落;霉菌、酵母菌选择无菌水稀释样品,3天观察时将所有酵母菌做标记,若有霉菌被培养出,不可随便打开器皿盖,等到培养物高压灭菌后再清洗。