HPV 诊断中采取PCR 检验的价值分析

人乳头瘤病毒（HPV）被认为是宫颈癌发生发展的关键因素之一。随着公共卫生意识的提升，如何尽早发现并准确诊断 HPV 感染，已成为临床妇科工作的重要环节 [1]。目前常见的检测方式主要有第二代杂交捕获法与聚合酶链反应（PCR）。HC- Ⅱ因操作便捷被广泛应用，但在灵敏度与特异度方面存在一定不足。PCR 作为分子生物学技术的代表，能够对病毒核酸进行特异扩增，在检测灵敏度、分型能力以及对早期病变的识别方面显示出独特优势。本文通过比较两种方法的临床表现，进一步分析 PCR 在 HPV 诊断中的实际应用价值，为宫颈疾病的筛查与早期干预提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

筛选 50 例确诊确诊宫颈病变怀疑 HPV 感染女性为对象，纳入时间为 2023 年 1 月 -2025 年 4 月。全部患者中年龄 28-64 岁，平均年龄（ 41.86±5.35 ）岁，其中已婚 39 例、未婚 11 例。纳入标准 : 具备病理学诊断资料。资料完整。认知良好签署知情同意书，能够配合检查。排除标准：存在检查禁忌、资料缺失或妊娠、哺乳期患者。

1.2 方法

全部受检者均接受两种方式检测，即：（1）实时荧光 PCR 检测。在样本采集环节，先将宫颈充分暴露，用拭子去除表面分泌物后，将宫颈刷置于宫颈口处，逆时针方向旋转数次以获取细胞样本。采集完成后，将刷头置入保存液中并折断，密封并做好标记。随后进行前处理：样本短暂离心后弃去上清，加入 DNA 裂解液混匀，加热至 100^∘C 维持约 10分钟，再次离心并去除部分上清，即可获得扩增所需模板。检测步骤严格依照试剂盒说明书完成，最终以循环阈值（Ct 值）作为判定标准：Ct<37 判定为阳性， Ct⩾37 为阴性。

（2）第二代杂交捕获法。检测所用采样装置与试剂均为专业厂家提供。样本采集后，与 RNA 探针结合形成杂交复合物，该复合物能够与特异性抗体结合，并通过信号放大系统进行测定。检测时依据发光强度进行定量分析，以计算负荷量。结果判定以阈值为依据：负荷量⩾1.0μg/L 为阳性，低于此数值则视为阴性。

1.3 评价指标

（1）以最终病理诊断结果为金标准，将两种检查方式的检查结果与之对比，计算诊断效能。具体为：特异性 Γ=P/(L+P)×100% ；准确率=K+P/(K+L+M+P)×100% ；灵敏度 ，K 为真阳性、L 为假阳性，M 为假阴性、P 为真阴性。（2）计算不同级别宫颈病变两种检查方式的检出率并对比差异。

1.4 统计学分析

SPSS25.0 软件包分析，计数资料用率表示、卡方检验，（ false）表示等计量资料并采用t检验，以 P<0.05 表示差异具备统计学意义。

2 结果

2.1 诊断效能分析和对比（表 1）

50 例患者金标准确定 HPV 感染 40 例，PCR 检验诊断效能各方面均高于第二代杂交式捕获法（ P<0.05 ）。

表1 诊断效能对比

2.2 疾病分级检出率对比（表 2）

PCR 检验诊断对不同级别宫颈病变检出率均高于第二代杂交式捕获法（ P<0.05 ）。

表2 疾病分级检出率对比

3 讨论

宫颈癌的发生与 HPV 持续感染密切相关，因此早期、准确的诊断对于疾病的预防与控制至关重要 [2]。本研究结果显示，PCR 在灵敏度、准确性和特异性方面均明显优于第二代杂交式捕获法，尤其是在初级病变检出率上优势突出。这说明 PCR 不仅能够识别高危型别，还能在病变早期阶段提供更为可靠的诊断依据。

从检测原理上看，第二代杂交式捕获法通过RNA 探针与HPV DNA结合后，再借助特异性抗体与信号扩增系统实现检测。该技术在病毒载量较高的情况下效果尚可，但当病毒含量偏低时，往往容易出现假阴性。而PCR通过对特定核酸片段进行循环扩增，即使仅有少量拷贝也能检出，因此在灵敏度上具有明显优势。这种优势在早期宫颈病变的检测中尤为重要，能够减少漏诊风险 [3]。此外，PCR 在特异性方面同样表现突出。由于其扩增靶序列明确，假阳性率相对较低，检测结果更具可信度。相比之下，第二代杂交式捕获法可能受到探针交叉反应的干扰，增加了假阳性可能性，给临床诊断带来一定困扰。过高的假阳性率不仅会引起患者不必要的心理压力，还可能导致过度检查与治疗。PCR 的高特异度在优化患者管理方面显得尤为重要。在高危型 HPV 检测方面，PCR 的优势更加明显。高危型别持续感染与宫颈癌的发生密切相关，及时识别并追踪这些型别，对疾病预防与个体化管理价值极高。PCR 不仅能够确认感染情况，还能进一步分型，为风险评估与临床决策提供科学依据。而第二代杂交式捕获法通常仅能区分高危与低危类别，缺乏更精细的分型能力。然而，PCR 在临床推广中也存在一定局限。一方面，其对实验条件要求较高，包括仪器设备、操作规范和环境控制等，若管理不到位，容易受污染影响。另一方面，检测费用相对较高，可能限制其在基层医疗机构中的普及 [4]。因此，在实际应用中应结合医疗资源条件，权衡选择最合适的检测方式。

综上， PCR 检验高危型 HPV 感染效果较好，尤其是对于早期病变具备较高的检出率，值得参考应用。

参考文献

[1] 王辉. 实时荧光PCR 检验对高危HPV 检测的应用价值探析[J].科技与健康 ,2024,3(19):27-30.

[2] 昆阿依木·叶尔江 , 王豆 , 热米拉·热扎克 , 等 . 两种 HPV检测方法在新疆地区宫颈癌筛查中的应用效果对比 [J]. 现代妇产科进展 ,2023,32(9):641-644.

[3] 魏薇 , 马统雄 . 评价实时荧光 PCR 技术检测高危型 HPV 的临床应用效果 [J]. 医学食疗与健康 ,2023,21(34):59-60.

[4] 刘娜 , 李倩 , 鲁洁 . 基于多重实时荧光定量 PCR 技术检测高危型人乳头瘤病毒 E6/E7 mRNA 的临床研究 [J]. 贵州医药 ,2023,47(11):1683-1684.