红细胞叶酸及同型半胱氨酸在妊娠期糖尿病患者中的表达及对妊娠结局的影响

妊娠期糖尿病：妊娠期常见合并症之一，主要是由于妊娠后母体糖代谢异常所致的首次发生的糖尿病。近年来，随着医疗水平的不断提高，对于妊娠期糖尿病的诊断标准的变更，发现GDM 的发生率呈逐年升高趋势，妊娠合并糖尿病的孕妇 90% 以上为GDM，亟需关注和维护[1]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以2023 年1 月至2024 年12 月为限，以100 例到院接受产检孕妇为据，A 组：孕妇年龄均值（ 27.83±3.15⋅ ）岁；孕周均值（ 36.88±2.45) 周。B 组：孕妇年龄均值（ 26.12±2.87 ）岁；孕周均值（ 37.14±1.35^⋅ ）周。 基线资料P>0.05 。

1.2 方法

1.2.1 检测：仪器采用吉林省维尔医疗器械有限公司生产，型号为WD-480 的全自动生化分析仪完成检测；采用北京普利莱 (APPLYGEN) 基因技术有限公司， 上海抚生实业有限公司生产，货号为 E1017、FS-S60410、 E1025、 E1026-105 的试剂盒进行检测。

1.2.2 检测实施：⑴检测时间：孕周24-28 周和35 周。⑵检测方法：对孕妇采集 4ml 空腹静脉血，添加到干燥玻璃试管内，于 37^∘C 水浴箱温育15min ，接着进行离心处理，提取上清，置于 ⋅20^∘C 冰箱存储备用。

1.2.3 红细胞叶酸水平检测：⑴采用分辨免疫荧光法及全自动时间分辨免疫荧光分析仪完成检测。⑵检测方法：确保检测环境无菌无尘，将检测所需的包被反应条于温室中维持平衡，准备两个试管，分别标注上（标准管和实验管），前者加入对照液 20μl ，后者加入待检测的血清 20μl ，随之加入分析缓冲液 100μl ，振动培养，时长1.5h，完成3-4 次清洗（应用洗涤液），最后在每个孔中加入 100μl 铕标抗体工作液，振动培育，时长 1.5h，完成4-5 次清洗，于各个孔中加入 100100μl 增强液， 10min 振动培育，最后进行红细胞叶酸表达测定。

1.2.4HCY 水平检测：⑴采用化学发光法及全自动化学发光仪检测。⑵检测方法：⑴准备两个试管，分别标注标准管和实验管，依次对两个试管添加由 0.05M∖pH9.6 碳酸盐缓冲液所稀释的 200μl 抗体，并设置空白对照，放置 4^∘C 室温环境中（1 夜），抽滤针头将其中液体吸干，清洗3-4 次（1 次/2ml），静置 sinin 左右，清洗管中液体，PBS 缓冲液稀释对抗体标准品和待检测清液。每个试管中均加入 200μl ，空白对照试管仅加入抗体稀释液体，置于室温 37^∘C 的环境中，培养 24h，洗涤液清洗 3 次，再采用含有小牛血清PBS 缓冲液稀释HRP 标记后的抗体，每个试管内加入 200μl ，空白试管仅加入稀释酶标抗体的稀释液，置于 37^∘C 室温环境中，培养 24h，清洗 3次，每个管中加入底物溶液 200μl , 37^∘C 行 15min 保温处理。最后加入300μ↕5.0×10.4M luminol，记录化学发光强度，测定两组HCY 表达。

1.3 统计学方法

采用 SPSS21.0 软件进行 t 检验， χ2 检验或 Fisher 精确检验。

2 结果

表1 两组实验效果比对（⎯x±s、n、％）

3 讨论

研究结果显示，叶酸在机体多种代谢过程中扮演重要角色，其含量减少时，可能导致孕妇同型半胱氨酸（HCY）水平升高。而对妊娠期糖尿病患者提供叶酸干预，可极大缓解病情进展，只是单一应用效果不佳，需准确评估妊娠期糖尿病患者体内叶酸情况，并观察红细胞叶酸表达状态，若红细胞叶酸水平较低，则表明患者叶酸缺乏，需积极补充，以保障母婴健康[2]。HCY 是一种巯基氨基酸，表达上升时，可经金属离子诱导，自身氧化生成氧自由基与过氧化氢，引发内皮细胞功能及结构受损及损害，使血管活性物质紊乱，造成机体中小动脉出现痉挛, 导致血压水平上升, 在妊娠期高血压病症的产生、进展中有所参与。该物质升高时可导致机体中血糖水平上升, 减缓了胰岛素的灵敏性, 使血糖代谢失衡, 也是诊断妊娠期糖尿病患者发生不良妊娠结局的主要指标。此外，妊娠期HCY 可经促使非对称性的二甲基精氨酸表达提高, 加剧氧化应激反应, 在炎症反应中有所参与, 引发母体及胎盘的血管内皮细胞的功能异常、 DNA 受损, 促使平滑肌细胞出现增殖, 致使患者出现妊娠不良结局[3]。

参考文献

[1]余德玲,杨丽,李顺启.妊娠期糖尿病患者载脂蛋白B/A1 比值、叶酸代谢相关基因多态性及血清同型半胱氨酸水平与妊娠结局的相关性研究[J].实验与检验医学,2024,42(5):450-454,472.

[2]郭霞.同型半胱氨酸在妊娠期糖尿病患者中的表达及与叶酸、维生素B12、血脂的关系[J].新疆医学,2022,52(3):305-307.

[3]秦彦,马秀琴,杨菁菁.同型半胱氨酸、叶酸浓度与妊娠期糖尿病的关联研究[J].中国妇幼健康研究,2021,32(3):427-429.

基金项目：山东省医学会红细胞叶酸与妊娠期合并症、并发症及妊娠结局的关联性研究专项资金（孕期增补叶酸对子代生长发育影响）

项目编码：YXH2022ZX06283）