牛巴氏杆菌病的快速诊断技术对比及临床应用研究

【关键词】随着分子生物学和免疫技术的快速发展，当前牛巴氏杆菌病的诊断具有了新的方法，不仅能够降低误诊率，而且还能快速的完成检验，并对病因进行细化的分析，显著提升了检测效率。通过采取技术置换的方式，能够改善传统检测方式中的不足。通过监测抗体的动态变化，还能够为疫苗的免疫效果提供有效的参考指标，从多维度对牛巴氏杆菌病进行溯源，不仅能够创造巨大的经济价值，也能够有效保障养殖行业的稳定发展，并对其进行有效的预防。本文就牛巴氏杆菌病的快速诊断技术对比及临床应用研究展开论述。

、实时荧光定量 PCR（qPCR）

qPCR 是牛巴氏杆菌病的一种核心分子检测技术，主要原理是通过靶向扩增多杀性巴氏杆菌的特异性基因片段，既牛巴氏杆菌病的致病细菌，利用荧光染料和探针对其进行有效检测。在检测过程中，检测数据为实时动态，一般两到四个小时就能完成样本处理到结果研判的整个过程，灵敏度与传统的检测方式相比大幅度提升。通过该种检测方式，能够精确的分析出样本中的多杀性巴氏杆菌的原始浓度，从而判断病情的严重程度。同时，该种检测方式相对安全，在检测过程中不需要暴露样本，不仅能够提升精准性，也能够避免细菌的进一步传播和污染。

在临床应用场景上，qPCR 可以广泛应用于牛巴氏杆菌病的早期诊断。当出现可疑病例或者疫情爆发时，可以利用此技术进行大范围的排查与检验，从而及时的作出干预，避免疫区的扩散而造成严重的后果。通过采用 qPCR 检测技术，还能够对病原进行有效的溯源，在动态监测数据的帮助下，能够判断出动态治疗的干预措施的效果，为用药决策方案的调整提供支持和参考。其具备的高可靠性还能减少误诊的可能，让临床应用拥有了更加广泛的场景。

二、重组酶聚合酶扩增技术（RPA）

重组酶聚合酶扩增技术（RPA）是最新的牛巴氏杆菌病检测技术之一，其原理为模拟体内DNA 的复制，在恒温的条件下实现扩增，摆脱对精密温控设备的依赖，是一种新兴的等温核酸扩增技术。其中三个关键部分协作作用，包括重组酶与引物结合形成复合体；单链 DNA 结合蛋白及时解开单链区域，有效防止其退火；DNA 聚合酶沿模板链实现扩增循环，实现指数的扩增，检测效果与qPCR 相似。

在临床应用场景上，重组酶聚合酶扩增技术大范围应用于养殖场和屠宰场，通拓PRA 能够快速检测牛群中的多杀性巴士杆菌，检测速度可以缩短至 30 分钟以内，进一步提升了检测效率，助力疫情的早期处理。在临床应用中，重组聚合酶扩增技术还能在艰苦条件下进行使用，在电力资源匮乏和设备不完善的地区，PRA 可以通过太阳能的方式实现无电源检测，有效推广了多杀性巴氏杆菌的检测范围。而且由于其检测速度相对较快，能够在不同的场景高频的进行检测，防止病原的跨区传播。

三、胶体金免疫层析技术（GICA）

不同于分子生物学检测技术，胶体金免疫层析技术属于免疫学的范畴之内。其基于抗原-抗体的特异性结合，能够利用单克隆抗体作为捕获剂，对多杀性巴氏杆菌病原进行检测。当样本中存在目标抗原时，能够与胶体金标记的单克隆抗体结合，从而在纸条上进行层析，为检测人员提供可观察的带颜色的条带，检测时间进一步缩短为 15 分钟。GICA 技术优势相对比较明显，体积小便于携带和使用，让其成为当今主流的多杀性巴氏杆菌检测方式。

在临床应用中，胶体金免疫层析技术由于检测方式便捷、检测成本相对较低，广泛应用于养殖场的日常检测，常常用在大范围的抽检和疫情初期的大规模筛查中。但是由于其检测结果准确性相对较差，检测数据只能检测多杀性巴氏杆菌是否存在，而无法能够判断其死活。因此，胶体金免疫层析技术的临床应用场景被限制，无法在精准的检验中进行使用。

【结束语】综上所述，牛巴氏杆菌病快速诊断技术中，实时荧光定量 PCR（qPCR）灵敏度高、特异性强，可定量检测病原体核酸，评估感染程度，但依赖专业设备与人员；重组酶聚合酶扩增技术（RPA）在恒温下快速扩增，30 分钟内出结果，适合现场检测，但需优化探针设计以提高特异性；胶体金免疫层析技术（GICA）操作简便、成本低，15 分钟内显色判读，适合基层大规模筛查，但灵敏度略低且无法区分活菌死菌。三种技术各有优势，可互补应用于不同场景。

【参考文献】

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