基于经方 桔梗汤的桔梗- 甘草药对配伍研究

药对是临床上常用且相对固定的 2 味药或 3 味药之间配伍形式。药对配伍组成多具有一定规律，研究药对配伍有助于揭示中医方剂配伍的科学内涵，具有指导医生和药师临床用药的意义。桔梗 - 甘草为中药临床常用药对，该药对经加味可演化为清金化痰汤、托里消毒散、清肺汤等经典名方。

桔梗汤作为基本方治疗咳嗽、咽痛素有盛名。临床上治疗咽喉痛诸方大多由此方加味而成。桔梗苦辛，苦“能泄、能坚”，能清泄火热、泄降气逆、泻火存 阴；辛“能散、能行”，能开提肺气，宣通肺气；甘草有药之“国老”的称号，清热解毒，祛痰止咳，功效甚多；两者配伍，有补有散，有清有润，可适用于多种虚实夹杂的咳嗽。现代临床应用主治肺病，在儿科使用频率较高，常用于治疗哮喘咳嗽、咽炎、支气管炎、上呼吸道感染、肺纤维化等症。现代药理研究发现桔梗皂苷和甘草皂苷是桔梗汤的主要药效物质。桔梗汤的功效与桔梗 - 甘草的配伍有密切的关系，为更进一步证明桔梗 - 甘草不同配伍对桔梗汤有效成分的影响，本文进行了相关的实验设计。

1. 材料

实验用到的材料主要包括仪器、试剂以及试药等。用到的仪器主要有 1260 型高效液相色谱仪、超声清洗仪、分析天平、粉碎机等。试剂主要用到甲醇、乙醚、正丁醇、纯度 ⩾93% 的对照品甘草苷和甘草酸铵等，分别购自不同的试剂有限公司。试药分别是甘草饮片（来自吉林白城当地种植的甘草）和桔梗饮片，经鉴定，为甘草的干燥根和根茎，桔梗的干燥根。

2. 方法与结果

2.1 对照品溶液制备

用天平先称量甘草苷 2.01mg ，将称量好的甘草苷倒入 10ml 的量瓶中，用准备好的甲醇进行定容，待甘草苷完全溶解后，量取 1ml 溶液倒入 10ml 的量瓶中，加入称量好的甘草酸铵 2.19mg ，用甲醇定容后就得到对照品溶液。

2.2 不同配伍供试品溶液制备

本试验固定甘草饮片的量为 20g ，桔梗分别按照 1:3、1:2、1:1、2:1、3:1 的比例进行配伍。用10 倍水将二者浸泡，完全溶解后用文火慢煎，待溶液微沸后，保持微沸状态 15min ，之后用 80 目细纱布过滤，在烘箱中烘干至膏状后待用。将不同配伍比例的干膏取样，用甲醇定容后在清洗仪中提取 15min ，待其冷却后，用 0.22μm 微孔滤膜过滤后即得到试品溶液。

2.3 稳定性实验

为了验证试验的稳定性，以桔梗 - 甘草 1：2 的配伍比例进行重复试验，得到的试品溶液与第一次试验结果差异不大，说明试验的重复性好。将试品溶液在室温环境下分别放置 8h、12h、24h，之后进行色谱测定，结果表明，试品溶液在室温条件下 24h 内保持稳定，在预定的时间内完成试验设计，不会影响试验结果。

2.4 精密度试验

在试验过程中，仪器的精密度也会影响试验结果，为检验仪器的精密度，以桔梗 - 甘草 1:2 配伍比例再次进行干膏制备，试验方法同第一次，将取得的干膏进行色谱测定，结果与 第一次无差异，并进行了 4 次重复试验，结果差异不大，说明在多次试验中，仪器的精密度良好，不会影响试验数据。

2.5 不同配伍比例下甘草活性成分变化

桔梗汤中的主要有效成分是甘草苷和甘草酸，因此，试验中对活性成分含量的测定主要是以甘草苷、甘草酸为主。为得到更加精确的试验数据，对不同配伍比例得到的试品溶液含量测定重复 3 次实验，取 3 次实验的平均值作为统计数据。桔梗 - 甘草配伍比例为 1:3 时，甘草苷和甘草酸的含量分别为 2.212mg/g 、 8.432mg/g ；配伍比例为 1:2时，甘草苷和甘草酸的含量开始上升，分别为 2.493mg/g 、 8.798mg/g ；配伍比例为 1:1 时，甘草苷和甘草酸的含量开始出现下降，分别为2.025mg/g 、 8.426mg/g ；二者的配伍比例为 2:1 时，甘草苷和甘草酸的含量继续下降，分别为 1.932mg/g 、 7.657mg/g ；二者的配伍比例为 3:1时，活性成分含量继续下降，甘草苷含量为 1.795mg/g ，甘草酸的含量降为 7.382mg/g 。从得出的试验数据可以看出，在甘草量一定的情况下，随着桔梗量的增加，活性成分的含量均有所增加，但随着桔梗量的继续增加，活性成分含量开始下降，而且通过数据可以得出，在二者配伍比例为 1:2 时，甘草苷和甘草酸的含量最高，其余的配伍比例得到的甘草苷和甘草酸的含量均低于这个配伍比例得到的活性成分含量。

3. 讨论

目前经典方桔梗汤中桔梗、甘草药 用比例研究较少，《肘后备急方》中桔梗与甘草的配伍比例为 1:1，《伤寒论》的桔梗汤中桔梗、甘草的配伍比例为1:2，《小儿药证直诀》卷下中桔梗、甘草的配伍比例为1:2。为探索桔梗、甘草配伍比例多样变化对其药效的影响，尤其是白城地区道地药材的药效价值的深入开发及其临床应用，提供理论支撑较少。

本文通过实验设计研究桔梗- 甘草最优配伍比例，固定甘草的量，增加桔梗的 量，设计 5 组不同的桔梗甘草配伍比例，探讨不同配伍比例对甘草有效成分溶出的影响。按古方水煎法制备不同桔梗配伍甘草，采用高效液相色谱法（HPLC）测定其中甘草酸和甘草苷的含量，探究桔梗汤中桔梗 - 甘草的最佳配伍比例为 1:2，与《伤寒论》中的配伍比例一致，具有重要的理论意义。不仅如此，本研究还为挖掘白城地区道地药材桔梗和白城甘草的药用价值，为白城道地药材尤其是白城甘草在经典方剂中的深入开发及其临床应用提供了理论支撑。

桔梗- 甘草药对的研究角度比较多，本研究以配伍比例为切入点，以甘草苷、甘草酸的含量为判断依据，研究得出了经典名方桔梗汤中桔梗 - 甘草的最优配伍比例。实际上，不同药材配伍后产生的新的化学成分较多，从目前来看，对于桔梗 - 甘草配伍后的化学成分含量变化的研究并不深入，后续应该加大对这一经典处方的研究力度，提高对经典处方的认识，推动其在临床上的广泛应用，为我国的传统中药处方研究及临床应用提供参考。

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课题：2024 年吉林省中医药管理局“白城甘草 - 桔梗药对不同配伍比例有效成分含量及抗氧化活性的影响研究”（课题编号 ：2024352）

作者简介：郭健，女（1987.11-）吉林白城人，硕士研究生，讲师，研究方向：中药教育与研究