规模化肉牛场布鲁氏菌病的血清学监测及净化方案构建

引言：布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌属引发疾病，会对牛、羊、猪等家畜产生主要影响，与此同时还会对人类健康造成重大威胁。这种疾病在大规模肉牛养殖场里的表现格外明显，会让肉牛产量降低，导致经济损失不断上升，还对肉类市场的安全状况造成了负面效应。伴随肉牛产业飞速发展，让牛群保持健康与安全成了养殖者的一项关键工作，构建一套有效血清学监测系统，从而能够在早期就察觉并遏制布鲁氏菌病的扩散，有着极高重要性。给已染病的牛群制订科学合理的净化计划，可有效减少疾病风险，让牛肉生产效率得以提升，同时增强市场竞争力、本项研目标是对规模化肉牛场布鲁氏菌病开展血清学监测，并构建相应净化方案，为肉牛养殖行业的持续发展给予理论支撑和实践指引。

1. 布鲁氏菌病的血清学监测过程

1.1 材料及试验设备

在布鲁氏菌病血清学监测工作开展期间，运用一系列标准化流程与设备，以此保障检测结果精准性和可信。按照该牛场的免疫时间安排，由驻场兽医师针对该牛场免疫时间开展血样采集工作，样本即刻被冷藏保存，并且快速送到当地市动物疫病预防控制中心开展血清制备与检测。

检测时运用多种关键诊断试剂和器材，在虎红平板凝集试验（RBT）里，需要用到的器材有微量移液器、灭菌移液器吸头、牙签、计时器、洁净玻璃板和生物安全柜，主要试剂为青岛立见生物科技有限公司所提供的布鲁氏菌虎红平板凝集抗原，以及标准阴性和阳性血清。间接酶联免疫吸附试验（iELISA）所用到器材有 96 微孔苯乙烯板、单道移液器、多道移液器、酶标仪、旋转振荡器、盖板和洗板机，检测所需要试剂出自青岛立见生物科技有限公司的 iELISA 抗体检测试剂盒。试管凝集试验（SAT）用到玻璃试管、试管架、移液器、37℃恒温箱、三角瓶和量筒。相关试剂也是由青岛易邦生物工程有限公司供应，涵盖布鲁氏菌病凝集抗原以及标准阴性、阳性血清，在竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）里，器材和 iELISA 类似，主要会用到 96 微孔苯乙烯板、单道与多道移液器、酶标仪、旋转振荡器、盖板以及洗板机，检测所需试剂同样由青岛立见生物科技有限公司供应。

1.2 试验方法

进行布鲁氏菌病血清学监测时，按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T 18646-2018）来实施操作并做出判定，第一步进行虎红平板凝集试验，把待检测的血清样本和带有布鲁氏菌抗原的虎红平板放在一起，查看是否出现凝集反应。依据初步筛选结果，阳性或者可疑样本会进一步开展间接酶联免疫吸附试验，从而证实初步检测结果并检测抗体水平，对于初筛结果显示为阳性或有可疑迹象的样本，之后进行试管凝集试验（SAT）来复核，将待检血清和已知浓度布鲁氏菌抗原放在一起混合，在 37℃条件下进行孵育并对凝集反应加以观察。测定待检血清凝集效价，进一步明确感染状况，还能够进行竞争酶联免疫吸附试验，借助检测样本中抗体与标记抗原之间的竞争反应，得到定量数据。按照中华人民共和国布鲁氏菌病检测国家标准，待检测血清的凝集效价达到 1：100 以上牛样本，会被判定为患有布鲁氏菌病，若凝集效价为 1：50 后，就认定是可疑反应。

1.3 试验结果

利用以上试验操作方法后，该牛场测试结果如下表：

表 1 虎红平板凝集试验（RBT）结果检测表

表 2 间接酶联免疫吸附试验（iELISA）结果检测表

表 3 试管凝集试验（SAT）结果检测表

表 4 竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）结果检测表

从表看出，在 2020 年至 2023 年期间，围绕奶牛场布鲁氏菌病防疫工作这一关键任务，实施系统血样采集及检测，对奶牛血样实施初筛工作，采用手段为快速血凝试验，接着利用补体结合试验（SAT）和竞争性酶联免疫吸附实验（cELISA）开展复检工作。RBT 检测结果呈现，从 2020 年至 2023 年这一时间段，从 2020 年到 2023 年，阳性率依次呈现为 1.25% 、 1.96% 、1.98%和 0；iELISA 检测呈现的数据为 0.93% 、 1.96% 、 1.14% 以及 0，在连续 4 年中，SAT 阳性率持续逐年降低，其数值分别为 0.60% 、0.32% 、0、0、0 和 0；cELISA 历经四年，均未检索到阳性情况，这些结果呈现出，经过为期 4 年监测，尽管 RBT 和 iELISA 两项检测均呈现出阳性初筛结果，然而通过 SAT 和 cELISA 开展确诊检查后，未查找到感染病例，体现出该奶牛场在布病防控方面达成了显著成效。

在奶牛布病净化工作推进期间，该场依照规模化奶牛场主要动物疫病净化技术指南，切实强化管理工作，配置了相应的设施与专业人员，借助定期开展的监测与检测工作，及时甄别病畜并进行淘汰处理，并且同步实施分群饲养的方式，打造健康奶牛群体。面向阴性群体，实施了更为严格的防控举措，逐步达成了布病的净化目标，经过长达四年的不间断监测，证实该奶牛场在 2020 年到 2023 年这一时间段内未出现布鲁氏菌病阳性病例，有力地佐证其在布鲁氏菌病防控方面的成功举措，表明布病净化目标正逐步得以实现。

2. 牛场布鲁氏菌病净化方案构建

2.1 牛群筛查与分类

对肉牛场内牛只开展系统性检测和划分工作中，为确保能有效找出病牛和潜在感染源头，在实际开展时，要完成全群抽样，一般会借助随机抽取的方式，获取处于不同年龄、性别和生产状态的牛只的血液样本，基于检测结果，将牛群划分成健康牛、潜在感染牛和感染牛三大类别[1]。

对于血清学检测而言，主要检测方法推荐采用酶联免疫吸附实验，该方法可高灵敏度和特异性识别出布鲁氏菌感染，样本处理和检测工作应由实验室按照标准操作程序开展，检测结果可靠性提升。检测开始前，要给每个样本做好标记，同时将牛只身份、年龄、性别以及采样日期等相关信息进行记录，包括牛只身份、年龄、性别以及采样日期。在得到检测结果后，按照血清抗体水平不同情况对牛群进行划分，无抗体反应是健康牛群特征，抗体反应呈低水平为潜在感染牛，抗体反应明显则是感染牛。在筛查工作开展期间，可对各个牛群开展双重检测工作，为保障结果精准度，一旦发现牛只抗体呈阳性，应即刻将其隔离起来做观察处理，实施进一步确认检测，如血清凝集试验或 PCR 检测之类的。为排除抗体阳性牛只出现假阳性状况。针对已确认感染牛只，要对其健康状况、生产记录和历史信息开展详尽的记录工作，涵盖其健康状况、生产记录和历史信息等内容，为方便后续对已确认感染的牛只开展管理工作。在牛群被分类完毕后，对各类牛只健康状况的监测工作需定期开展，针对有潜在感染风险的牛，血清学检测需高频次开展，以此对抗体水平的变化情况加以观察。借助不间断监测，能够对潜在感染牛病情走向作出判断，适时实施干预行动。牛群完成分类后，需依据风险等级实施差异化管理，正常生产可以继续让健康牛开展，对于感染牛和潜在感染牛，要依据具体情形采取不同管理手段，采取如隔离、治疗或者淘汰之类的差异化管理举措，为防控布鲁氏菌病扩散[2]。

2.2 疫苗接种

面对肉牛场的布鲁氏菌感染问题，挑选适宜的疫苗并拟定科学的接种方案十分关键。牛只接种工作应在其生理成熟阶段开展，一般首次接种选在牛只 6 至 8 个月龄时进行。对于免疫程序而言，建议在完成首次接种后，按照既定时间间隔进行强化免疫，常用疫苗类型有活疫苗和灭活疫苗，活疫苗一般具备更强的免疫原性，但在接种之后有可能造成轻微的临床症状，而灭活疫苗比较安全。

在疫苗接种期间，应保证牛只健康，防止在疫苗接种期间出现其他疾病，疫苗使用剂量要严格按照生产厂家的推荐说明执行，一般每头牛接种剂量是 2mL，要选择恰当的注射部位，一般会选择在颈部或者肩部的肌肉处进行注射，以保证疫苗可以有效吸收。需要对牛只反应进行观察，涵盖注射部位肿胀、发热等表现，第一时间记录并处置异常反应，建议定期对牛群开展血清学监测，以此评估疫苗接种效果，监测可借助血清样本检测，查看抗体水平的变动情况。首次检测一般在接种后的 4 到 6 周进行，之后每隔三个月检测一回。依据监测数据，评判免疫效果，倘若发现抗体水平低于预计值，就需要考虑重新接种疫苗或更改免疫程序，在疫苗接种的管理工作里，建立详尽的接种记录十分关键，记录内容包含牛只的身份信息、接种日期、疫苗批号、接种人员和观察结果等，这些记录可为后续的免疫效果评估和管理决策提供支撑，保障疫苗在运输与存储时的温度调控，防止疫苗失去效力，疫苗需存放在 2 至 8℃环境里，需定期评估疫苗接种的总体效果以及牛群的健康状态，依据监测结果，逐步改进接种方案，以保障达成预期的免疫效果[3]。

2.3 管理措施

有效管理举措涵盖饲养管理、环境卫生、消毒流程以及牛群健康监测，饲养管理工作需依照科学饲养准则，保证牛只能得到均衡营养，防止免疫力降低。要定期对饲料进行检测，保证无污染物，还要维持恰当存储条件，杜绝霉变与虫害。需把牛只的饲养密度调控到合理范围，减小应激和疾病传播的几率。良好环境卫生是阻止布鲁氏菌传播关键要素，肉牛场应当定时清理并消毒牛舍，维持环境整洁，应保证牛舍地面处于干燥状态，要定期清理粪便，杜绝病原体滋生，选择消毒液要针对布鲁氏菌的耐药性情况，像氢氧化钠和过氧化氢这类都是常用的消毒剂，且需定期更换，消毒工作需在牛只离开之后开展，保证牛只生活在清洁的环境里[4]。

在牛群健康监测进程里，定期开展血清学检测，从而及时找出感染病例，监测工作需涵盖对新购入牛只实施隔离观察，保证它们在加入主群之前接受全方位的健康评估，对于明确感染的牛只，采取隔离手段，采取单独圈养的形式，杜绝其与健康牛只接触，牛群的健康档案要详细记录每头牛的健康情况、接种详情以及检疫过往，以利于追踪和管理。对员工开展定期培训，提升员工对布鲁氏菌病防治知识认知，是管理措施中必不可少一环，员工需掌握布鲁氏菌传播途径、症状表现以及防控措施，保证在日常工作中严格依照卫生标准执行，牛场需明确设立生物安全措施，对外来人员和车辆的进入加以限制，必要时开展健康检查，所有进入场地的人员都要穿着干净的工作服并佩戴防护装备，降低外界病原体的带入，要构建完善的记录与反馈体系，按周期审查管理措施的落实状况，及时找出并处理问题，保障布鲁氏菌病防控工作的持续有效性[5]。

2.4 生物安全措施

在大规模肉牛养殖场防控布鲁氏菌病时，生物安全措施是保障场内牛群健康的关键要素。为此必须在场地入口与出口设置严格的健康监测机制，凡是进入场地的人员都得开展健康检查，其中包含体温测量和健康情况申报，外来人员需穿着专门的工作服、鞋子并佩戴防护设备，防止与牛只或其粪便直接接触。外来车辆进入场地时，需在入口处接受消毒处理，应挑选有效杀菌剂作为消毒液，保证车轮、底盘等关键部位能得到全面处理。应当定期对场内的全部设备和工具进行清洗与消毒，尤其是在和牛只直接接触之后，针对牛舍、饲料储存区域以及饮水设施等地方，需为牛舍、饲料存储区以及饮水设施等区域制定定期的消毒流程，其中涵盖用浓度适宜的消毒剂进行喷洒操作，保证每周开展至少一次的全面消毒工作，以保障环境干净卫生。在牛只管理进程里，对牛只实施定期的健康检查工作，留意牛只是否呈现异常状况，若有可疑病例应立刻进行隔离，杜绝疫情进一步蔓延，应依据风险评估结果对牛群的饲养与管理进行分组，杜绝不同来源牛只产生接触，要保障牛只饮水及饲料的来源安全，并且杜绝使用未处理过水源和饲料，防止潜在病原扩散。在养牛饲养管理环节，定时清理牛舍，将粪便与污物清除掉，让环境维持干燥且通风良好的状态，降低病原生长几率，每次牛只更换或进出养殖场的时候，要全面清理并消毒场地，保障牛只在新环境中健康与安全，让场内的疫苗接种工作保持有序推进，将每头牛疫苗接种状况记录下来，并且实时更新疫苗接种相关记录，让每头牛都在恰当的时间完成疫苗接种。

结语：在规模化肉牛场的管理工作里，构建布鲁氏菌病的血清学监测与净化方案极为关键，借助科学的监测办法，能够在疫情早期就进行识别和管控，由此有效削减经济损失以及公共卫生风险，推行系统化的净化方案，既能够保障牛群健康，提升养殖的效益，又能为肉牛产业实现可持续发展提供坚实支撑，伴随监测技术持续地改进与提升，通过在布鲁氏菌病防控领域实现更大的突破，助力规模化肉牛养殖健康发展。

参考文献：

[1]刘维俊，徐国英，曾志伟，等.福建省2023 年布鲁氏菌病流行病学特征及血清学监测结果分析[J].海峡预防医学杂志，2025，31（01）：1-3+8.

[2]郭红佳，普朝华，邵勇，等.2019—2023 年云南省新平县家畜布鲁氏菌病血清学监测[J].中国动物检疫，2025，42（01）：14-17.

[3]陈世云，刘凤尾，彭艳伶，等.2018-2023年西昌市某奶牛场布鲁氏菌病血清学监测分析[J].山东畜牧兽医，2024，45（04）：18-19+22.

[4] 林为民， 刘强， 孙新文， 等. 新疆石河子地区奶牛布鲁氏菌病血清学监测[J]. 中国奶牛，2024，（04）：24-27.

[5]黄晓兵，张红丽，刘爱军，等.2018—2022 年浙江省羊布鲁氏菌病血清学监测分析[J].中国动物检疫，2024，41（03）：15-18.

作者简介：纳洪旗（1967.03.13——），男，回族，籍贯：宁夏，职称：高级兽医师，学历：大学本科，研究方向：畜牧、兽医。