松露菌根培育技术研究进展

松露也称块菌，是一类地下食药两用真菌，松露是外生菌根菌，其生长需要经历三个阶段，即菌丝体的萌发、外生菌根的发育、子囊果的形成。目前，国内外的学者已对不同种类松露对不同宿主植物的侵染、接种技术及其分离鉴定、松露的遗传多样性、松露的人工栽培与造林技术等方面有了大量的调查研究。笔者对此进行阐述，为今后更好地研究和生产松露、挖掘松露的潜在价值提供参考。

一、松露菌根的培育

（一）材料的准备及处理

选择松露接种材料及宿主植物。松露并不是对所有宿主树种都可以侵染，而是具有一定的专一性和选择性。在选择材料时，应该选择适宜的宿主进行接种，这是松露菌根培育成功的基础，并且不同的松露接种材料对菌根培育条件适应性也不同。一些接种材料，如意大利白松露，许多栽培方式都难以成功，其菌根在能生产松露的种植园中十分稀少，在野外采样中，通过多位点分子标记电泳的方法，其外生菌根只被鉴定出一次。松露最常见的宿主树种有榛子、栎树、云南松、华山松等，我国也有接种美国薄壳山核桃的案例。目前，已有16 种宿主植物被证明可以与印度松露共生，如华山松、板栗、云南松、毛叶青冈、园叶杨等，比黑孢松露更适合进行人工种植。另外，即使是同一树种，不同性质的幼苗对松露的侵染也有一定影响，例如：黑孢松露在无性系苗根系上形成菌根更加容易。

1.育苗及接种基质基质除提供幼苗和菌根

为减少其它共生真菌的竞争性影响，基质需要进行高温灭菌，普遍情况下，基质 采用一定比例混合均匀的蛭石、珍珠岩或泥炭土、钙质土、河沙等，并需要测定其pH，大部分的松露需要 pH7～8 的钙质土，而波氏松露能够承受微酸性的土壤[1] 。一般来说，育苗基质和接种基质的 pH 有差异，育苗基质其 pH 要求为 6.5～7.0，可加入石灰或石灰石进行调整使接种基质 pH 为 7.0～7.5，pH 调节之后，一般在 121～126‰ 高温下灭菌2 小时 。

2.无菌苗的培育

无菌苗的培育一般在每年 3 月，种子经过春化处理，发芽率更高，用一定浓度的H₂O₂ 溶液或高锰酸钾溶液浸种消毒一定时间，之后用无菌水冲洗掉表面残留的溶液，再将种子用无菌水浸泡一段时间，不同宿主植物所需浸泡时间不同，并每隔一段时间换一次水。将处理过的种子播入已灭菌的混合基质中催芽，一般经过检测合格可用于菌根苗的培育。一般苗龄达 3 个月，根部开始木质化即可进行接种。

（二）接种无菌苗

1.接种材料的制备

将松露子实体表面经 75% 的酒精消毒杀菌处理，粉碎过后与无菌河沙或灭菌土等物质按一定比例混合制成孢子接种材料或将松露子囊果破碎并过筛后与无菌水按一定配比配制成孢子悬浮液，用于接种。

常用的接种方法有三种：一是采用孢子悬浮液法，该方法简便易行，即用消毒处理的松露，无菌条件下打碎、研磨、过筛后，将其按照一定比例与无菌水混匀，做为接种材料，在接种无菌苗的时候，用注射器吸取适量孢子悬浮液，注射在无菌苗根部，尽量均匀地在盆钵内的无菌苗四周注射接种一定剂量的孢子悬浮液[2]，用于松露菌根苗的培育；二是利用消毒处理的松露，在无菌条件下打碎、研磨、过筛后，将其按照一定比例与无菌的河沙混匀，做为接种材料，在接种无菌苗的时候，用药匙挑取吸取适量接种材料，施加在无菌苗根部；三是采用省农业科学院土壤肥料研究所李小林课题研发的松露接种菌剂——发明专利名称为《人工培育松露菌根苗接种专用复合剂及其制法和使用方法》通过 A 和 B 两种制剂的混用，以达到快速培育松露菌根苗，提高根系侵染和移栽成活率的作用。在相同培育条件下，使用该技术及菌剂可以缩短松露菌根苗的形成时间 15～30 d，提高根系的侵染强度 15%～20% ，显著提高植株的抗性和移栽成活率。

2.在培育过程中影响松露菌根合成的因素

促进或抑制松露菌根合成的外在压力是外生菌根。菌漆蜡蘑对松露菌根合成有抑制作用，存在于波氏松露子实体中的暗孢节菱孢菌能诱导根系缩短和次根的形成从而促进菌根的形成[3]。

接种菌液浓度及剂量的使用。用不同松露孢子菌液浓度及剂量接种，会对菌根合成、苗木的生长产生显著的差异，如松露苗木菌根化，采用浓度范围为 0.5%～2.5% （含子实体 5～25g/L ，孢子量 1.6～ 9.1 万个/mL）的松露菌液对华山松和马尾松的芽苗接种菌液 2 mL，结果表明，不同浓度菌液接种，高低浓度相比，感染指数可提高 50.1%～125.1% 。

3.松露菌根的检测与鉴定。定期对菌根形态进行观察并检查其是否受到污染是十分重要的，这直接影响到子实体的形成。接种后，条件适宜，一般 2～3 个月在体视显微镜（Leica M80）下[4]，可以首次观察到菌根，进一步可采取分子鉴定和形态学检测、观察菌根，检测指标一般包括感染强度及菌根感染率等。区分松露和黑孢松露可采用分子生物学的分析手段，对两种块菌 ITS 序列进行 DNA 测序，借助 PCR 技术扩增 DNA 的目的片段，将测序得到的 ITS 序列与这两种块菌的已知 ITS 序列比较，从而对块菌种属进行区分。

松露作为一种珍贵的食药用真菌，含有许多活性物质，对人类具有重要的价值。从全世界对松露的研究来看，物种的鉴定、多样性分析、系统演化、菌根合成和种植仍是当前块菌属研究的主要内容之一。

各有关地区加强块菌资源的保护，加强科研投入，完善、发展、提高松露菌根苗人工培育管理技术水平，探索块菌形成的机理机制，实现产业的持续、健康、稳定发展，力争我国成为松露产业发展大国。

参考文献：

[1]任德军，宋曼殳，姚一建 .中国块菌属研究概况[J].菌物研究，2005（4） ：37-46.

[2]潘高潮，何云松，李峰等.黑孢块菌纯菌种对树根的侵染研究[J].江苏农业科学，2011（3）：228-229.

[3]胡炳福，朱忠荣，远香美，等.印度块菌菌根合成及其对苗木促生防病效果试验[J].贵州林业科技，2004（2）：19-24.

[4]张小雷，李树红，李世彪，等.印度块菌与园叶杨合成菌根苗技术初探[J].中国食用菌，2011（6）：18-20.基金项目：文章系 2025 年省大学生创新创业训练计划项目《栉松沐——露松智慧种植世界领跑者》阶段性研究成果。编号：S202512965001X。