两种免疫检验方法测定乙型肝炎标志物的价值

乙型肝炎病毒是一种嗜肝病毒，主要存在于肝细胞中，能够对肝细胞造成直接伤害，导致肝细胞出现炎症、纤维化等问题，继而引发肝炎、肝硬化，甚至是肝癌等肝脏疾病 [1]。乙型肝炎标志物是用于诊断乙型肝炎病毒感染的重要指标，不同标志物的组合还有助于判断感染阶段、传染性、免疫状态、治疗效果。以往临床多应用酶联免疫吸附法检测乙型肝炎标志物，具有操作简便、适用范围广、成本低廉等优点，化学发光免疫分析法则是一种现代免疫检验的新兴技术，具有灵敏度高、特异度高、自动化程度高、定量检测能力强、稳定性好等优点，本文特分析两种免疫检验方法测定乙型肝炎标志物的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将如东县中医院 2023 年 12 月至 2024 年 12 月接收的 75 例乙型肝炎患者纳入研究，其中男38 例，女37 例；年龄20＼～70 ）岁。

1.2 方法

血液样本采集与处理：抽取患者空腹静脉血 10ml （分装于 2 个试管中），放置于 4^∘C 环境中保存。对血液标本进行离心处理，应用专用仪器分离血清，开启仪器按照 3000r/min 的速度， 12min 的离心时间设置程序。获得血清标本，置入试管待检。

抗-HBe 免疫分析法：仪器：全自动化学发光免疫分析仪。试剂盒：配套的乙型肝炎标志物检测试剂。步骤（以 HBsAg 为例）：首先加样与孵育，取 25μL 血清样本加入反应杯，再加入标记抗体，之后孵育9～18min_⨀ 。其次磁珠分离，加入磁珠包被的捕获抗体，洗去未结合的游离标记物。再次获取化学发光反应，加入发光底物，产生光信号。最后检测光强度，仪器自动计算样本/ 临界值。

酶联免疫吸附法：仪器：酶标仪。试剂盒：配套的乙型肝炎标志物检测试剂。步骤（以 HBsAg 为例）：首先加样与孵育，每孔加入100μL 血清，覆膜后孵育 60min 。其次洗板，应用洗板机洗 5 次。再次加酶标二抗，孵育 30min ，之后二次洗板。依次每孔加入 50μL TMB 底物溶液，获取显色反应，之后每孔加入 50μL 终止液终止反应。最后酶标仪测定OD 值，计算Cut-off 值。

1.3 观察指标

两种免疫检验方法乙型肝炎标志物阳性检出率，两对半两种模式阳性检出率。

1.4 统计学分析

将数据录入 SPSS 28.0 进行检验，计数资料 的检验方式为 x² ， p<0.05 为对比有显著差异。

2 结果

2.1Z 型肝炎标志物阳性检出率

化学发光免疫分析法抗 -HBc 阳性检出率显著更高， p<0.05 ，其余无显著差异（ p>0.05 ），见表1。

化学发光免疫分析法两对半常见模式阳性检出率显著更高，p<0.05 ，见表 2。

3 讨论

化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法是检测乙型肝炎标志物的两种常用方法，既往以酶联免疫吸附法为主，具有设备简单、检测流程标准化、技术门槛较低、可用于大批量样本筛查等优点，但近些年陆续有研究指出，该方法存在灵敏度低、特异性不足、重复性较差、仅能定性 / 半定量等问题，具有一定的漏诊风险 [2]。化学发光免疫分析法虽然设备、试剂成本较高，技术要求较高，但灵敏度也高，可检测极低浓度的乙型肝炎标志物，同时特异性强，不易受溶血、脂血等问题的干扰，再加上采用全自动加样和检测，大幅度减少人为失误，降低漏诊风险，另外该方法可实现定性定量检测，精准测定不同标志物的浓度，为临床诊断、病情评估、疗效监测提供重要信息支持 [3]。本研究结果显示：化学发光免疫分析法抗 -HBc 阳性检出率显著更高（ p<0.05 ），其中原因就与该方法灵敏度高、特异性强、稳定性好、全自动化程度高等有关。本研究结果还显示：化学发光免疫分析法两对半常见模式阳性检出率显著更高（ p<0.05 ），其中原因主要与该方法的固相微粒子包被扩大了结合物的表面积，同时双抗原夹心法检测抗HBc，使待测抗原、抗体与固相包被抗体、抗原优先反应有关，而酶联免疫吸附法运用竞争抑制原理，逐一加样易造成待测抗体与酶标抗体同固相包被抗原的“不公平竞争”，导致假阳性结果出现，少见模式检出率提高[4]。

参考文献：

[1] 王亚彬 . 两种不同免疫检验方法检测乙型肝炎病毒感染血清学标志物的价值分析 [J]. 糖尿病之友 ，2023（4）：248-249.

[2] 李晓靖 ， 张静 ， 张可 . 研究电化学发光法和酶联免疫吸附测定法在检测乙型肝炎病毒感染血清学标志物中的应用效果 [J]. 中外女性健康研究 ，2024（2）：122-124.

[3] 熊钻 ， 梅玉峰 ， 王亚 ， 等 . ELISA 及 ECLIA 法在乙型肝炎病毒感染血清学标志物检测中的应用效果对比 [J]. 中国现代药物应用 ，2023，17（17）：74-76.

[4] 付源 . 分析两种免疫检验方法测定乙型肝炎标志物的比较 [J].特别健康 ，2022（1）：37-38.

通讯作者：顾峰，男，1996.01 生，汉族，人，本科，检验技师，研究方向：临床医学检验技术。