蜡块脱钙法在常规病理技术制片中对组织染色效果及切片优良率的影响

随着现代医学技术及生物学的不断发展，切片技术在病理检验中得到广泛应用。病理技术制片作为病理检验的关键内容，其中包含取样、固定、脱水、切片等多个环节，其中切片质量与病理检验质量息息相关 [1]。骨组织中含有大量的钙盐成分，特质较为坚硬，在实施常规病理技术制片时容易出现脱钙不全的问题，导致切片形态、性质受到较大影响，后期处理过程中易发生染色不均、空洞等问题，影响到检验结果的准确性 [2]。蜡块脱钙法通过利用石蜡与脱钙液，对样本中的骨组织、钙化灶等进行剔除，操作简单且安全性较高。本文将蜡块脱钙法引入到常规病理技术制片的实践中，分析其实际效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以前瞻性研究为手段，选取 2024 年 1 月至 12 月我院病理检验中70 块脱钙不足、钙化灶、砂砾体蜡块作为研究样本，根据脱钙方式不同进行分组，对照组为常规脱钙法，观察组实施蜡块脱钙法，各35 例。

1.2 方法

按照标准化流程配置脱钙液，选用甲醛、盐酸各 30ml ，甲酸与蒸馏水各 20ml ，先将甲醛加入到蒸馏水中，而后以此放入甲酸及盐酸，充分混合后制成脱钙液。两组样本均采用同样配置的脱钙液进行操作。对照组选用常规脱钙法，对蜡块直接进行切片处理。观察组采取蜡块脱钙法，通过对选取的样本进行观察，细致的对蜡块进行预处理，将多余的蜡进行清除后，选取最大切面处，放入到制备的脱钙液中，保持蜡块与脱钙液接触面积的最大化。浸泡 1h 后取出蜡块，对蜡块上附着的脱钙液进行处理，以清水清洗以减少脱钙液残留。选用达科为全自动脱水机对两组蜡块样本均进行脱水处理，而后制成病理切片。利用达科为全自动染色机来对切片样本进行染色处理，并利用封片机密封固定后，利用光学显微镜对切片进行观察，得出病理检验结果。

1.3 观察指标

组织染色效果：借助光学显微镜对切片组织染色效果进行评估，当细胞质着色清晰，层次明确判定为满意。

切片优良率：对蜡块切片质量进行评估，当整体切片完整，贴片恰当时赋 10 分，观察切片无明显固缩、龟裂碳化细胞核赋 30 分，切片厚度匀称赋 20 分，玻片整洁，封胶良好赋 10 分，无刀痕、未出现皱褶各 10 分。总分 >80 分表示优，总分在 60~80 分为良， <60 分为差。优良率 Σ=Σ （优例数 + 良例数） ÷ 总数 ×100% 。

1.4 统计学方法

采用统计学软件 SPSS（22.0 版本）对本次研究结果进行分析，计数数据以 [ 例 (% ）] 表示，选用 X² 进行检验。当 P<0.05 则表示组间数据差异化明显，具有统计学意义。

2 结果

2.1 组织染色效果比较

观察组组织切片染色后细胞核整体呈现出蓝色，细胞质为红色，钙化灶为蓝色，砂砾体表现为紫红色，整体颜色对比明显、边界清晰，统一度较高，染色满意例数为 34 例，总满意度为 97.14% ；对照组染色呈现出部分不均匀，染色满意例数为 28 例，总满意率为 80.00% 。两组相比较差异显著（ X²=14.509 ， P<0.001 ）。

2.2 切片优良率比较

观察组切片优例数为 20（57.14）例，良为 14（40.00）例，差为1（2.85）例，总优良率为 97.14% ；对照组切片优例数为15（42.85）例，良例数为 15（42.85）例，差为 5（14.28）例，总优良率为 85.71% 。两组相比较，差异显著（ X²=8.332 ， P=0.003 ）。

3 讨论

蜡块脱钙法能够实现对病理组织标本中钙质沉积物的有效去除，为病理组织检验提供良好条件，且整体操作方便快捷，不会对组织样本造成损害。研究结果显示，观察组的整体组织染色满意度及切片优良率均较高，这表明相较于常规脱钙法，蜡块脱钙法能够提升病理技术制片中的染色及切片质量，显示出较为理想的应用效果。分析其原因在于，蜡块脱钙法通过去除样本中的钙盐沉积物，防止其干扰后续的染色工序，确保染色试剂能够进入到样本组织内部，维护染色质量。相较于常规脱钙法，蜡块脱钙法通过对脱钙温度、时间等参数进行控制，能够在不损害样本的前提下实现脱钙，维护组织内部细胞的形态结构与特征，防止损伤样本而影响到后续的检验质量 [3]。同时，钙质沉淀形成的骨组织，整体性质较为坚硬，钙质去除及切片难度较大，如切片不完整很可能影响到检验准确性。而利用蜡块脱钙法能够缓解组织质地，组织较软而便于切割制片，有助于保持边缘平整、切片完整，防止因切片不当而损伤组织样本，也便于后期染色与观察，保障病理技术制片的可靠性，维护病理检验结果准确性。除此之外，蜡块脱钙法还能够用于钙化组织、软组织等多个组织制片中，应用广泛，显示出良好的应用价值。

综上所述，在常规病理技术制片中引入蜡块脱钙法，对于提升染色及切片质量具有良好效用。通过考虑到病理组织制片需求，优先选用蜡块脱钙法制片，相较于常规脱钙法染色更均匀、切片更理想，可推广应用。

参考文献：

[1] 林秋月 , 黄汉兴 , 吴海燕 . 蜡块脱钙法在常规病理技术制片中对组织染色效果及切片优良率的价值[J]. 中国医药指南,2022,20(35):85-88.

[2] 程宇 . 探讨蜡块脱钙法在常规病理技术制片中的应用 [J]. 智慧健康 ,2019,5(28):12-13.

[3] 郑玉琴 , 沈西华 . 探讨蜡块脱钙法在常规病理技术制片中的应用 [J]. 临床医药文献电子杂志 ,2019,6(35):18.